目的观察高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞中期因子(MidKine,MK)蛋白和基因的表达及与蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的关系,从细胞水平阐明 MK 在糖尿病肾病发生、发展中的作用;研究糖肾颗粒含药血清对高糖诱导肾小球系膜细胞蛋白激酶C、促纤维化因子TGF-β1和MK表达的影响,为其治疗糖尿病肾病提供新的实验依据。方法采用体外大鼠肾小球系膜细胞培养及血清药理学的方法,设立正常对照组、高糖组、糖肾颗粒组(低、中、高剂量)、贝那普利组(西药对照组)。药物干预高糖培养下肾小球系膜细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同作用时间(24h、48h、72h)下细胞增殖程度;采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测MK、TGF-β 1、PKC mRNA表达;采用蛋白质印迹技术(Western Blot)检测MK、TGF-β1、PKC蛋白表达;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测培养上清液中MK、TGF-β1、PKC含量。结果高糖(30.0mmol/L)能明显刺激体外培养的GMC增殖。糖肾颗粒及贝那普利两种药物血清对高糖刺激下的系膜细胞增殖有抑制作用,其中糖肾颗粒血清对GMC的抑制作用优于贝那普利血清,且呈一定的时间、剂量依赖性关系。与正常对照组比较,高糖组MK、TGF-β1、PKCmRNA及其蛋白表达上调(P<0.001),MK、TGF-β1、PKC分泌增加。与高糖组比较,糖肾颗粒和贝那普利两种含药血清均能逆转上述变化,糖肾颗粒的抑制作用强于贝那普利(P<0.05),且抑制作用呈一定的时间、剂量依赖关系。结论高糖可促进GMC增殖,糖肾颗粒能明显抑制高糖条件下GMC增殖,并呈一定的时效和量效依赖性关系。高糖可致GMCs MK、TGF-β1、PKC mRNA及其蛋白表达上调,并使MK、TGF-β1、PKC的分泌增加,MK与TGF-β1、PKC呈正相关。糖肾颗粒可下调GMCsMK、TGF-β1、PKCmRNA及其蛋白表达,同时,使MK、TGF-β 1、PKC分泌减少。