【摘 要】
:
DNA生物传感器的出现引起诸多领域研究者的关注。它是利用DNA自身的稳定性和碱基互补配对原则,并结合检测器的敏感元件、换能器和信号处理器检测靶标物的分析装置。与纳米材料结合的传感器因为具有简单、快捷、准确和良好生物相容性等优点,所以成为近些年来肿瘤早期筛查和诊断的研究热点。在构建DNA生物传感器时,可借助一些新方法和新技术提高传感器的各项性能,这对肿瘤标志物检测有十分重要的科学意义,将为临床癌症的
论文部分内容阅读
DNA生物传感器的出现引起诸多领域研究者的关注。它是利用DNA自身的稳定性和碱基互补配对原则,并结合检测器的敏感元件、换能器和信号处理器检测靶标物的分析装置。与纳米材料结合的传感器因为具有简单、快捷、准确和良好生物相容性等优点,所以成为近些年来肿瘤早期筛查和诊断的研究热点。在构建DNA生物传感器时,可借助一些新方法和新技术提高传感器的各项性能,这对肿瘤标志物检测有十分重要的科学意义,将为临床癌症的诊断提供参考价值。本文分为两章:第一章:本章基于聚多巴胺纳米粒子(Polydopamine Nanoparticles,PDANs)的光热效应和锁核酸(Locked Nucleic Acid,LNA)的特性,构建了一种荧光生物传感器用于检测Alu序列。其研制机理是:在Ca2+配位作用下,标记有FAM和LNA的探针DNA吸附在PDANs表面上,拉近了探针DNA与PDANs的距离,发生荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET),使FAM的荧光猝灭。当溶液中存在靶序列(Alu序列)时,探针DNA与Alu序列杂交形成双链(Double-stranded DNA,ds DNA)结构。此时,PDANs对ds DNA吸附能力较弱,探针DNA远离PDANs表面,FAM的荧光信号得以恢复,通过荧光信号的变化,从而实现对靶标物的检测。方法基于PDANs光热效应,用激光实现PDANs的光热转换,从而获得适宜的温度,再依据不同双链解链温度的差异和LNA的特性,有效减少了其他序列的干扰,实现对Alu序列高特异性的检测。该传感器的线性范围为5 n M~100 n M,检测限为1.30 n M。可望用于复杂生物样本中Alu序列快速、简便、环保的检测。第二章:本章基于目标诱导适配体片段连接技术,构建了一种检测血管内皮因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)的电化学适配体生物传感器。其研制机理是:首先,将捕获探针(Capture Probe,CP)固定在已修饰纳米钯(Nano-Palladium,Nano-Pd)的玻碳电极(Glassy Carbon Electrode,GCE)上。然后,将信号探针(Signal Probe,SP)和VEGF溶液同时加入到体系中,此时,VEGF与适配体的两段分裂探针(SP和CP)形成稳定的双茎环复合物,SP上标记的二茂铁(Ferrocene,Fc)基团靠近电极表面,从而产生电信号。相反,当VEGF不存在时,该体系不会产生电信号。最后,通过VEGF加入前后传感器电信号的强度变化,即可实现对其检测。实验结果表明,该传感方法的线性范围为5 p M~40 p M,其检测限为0.4 p M。因此,本章开发了一种高效、简便和灵敏的电化学生物传感器,并有望推广应用于临床重大疾病的诊断。
其他文献
目的本研究拟建立HCC术后预防性经肝动脉插管化疗栓塞术(transarterial chemoembolization,TACE)预后模型,筛选适宜行术后预防性TACE人群,为临床实践提供参考。方法本研究纳入原发性肝癌大数据数据库(第二军医大学东方肝胆医院福建医科大学孟超肝胆医院)2013年至2015年HCC行R0手术治疗病例1343例。以2013年至2014年单纯手术人群按1:1随机生成训练组及
目的B细胞慢性淋巴增殖性疾病(B-cell chronic lymphoproliferative disorders,B-CLPD)是一组形态学相似,临床表现惰性发展的累及外周血和骨髓细胞的成熟B细胞克隆增殖性肿瘤。本文旨在探讨初治B-CLPD患者的临床特征和免疫表型特点,及其对鉴别诊断的价值。方法回顾性分析231例我院血液科于2016年01月01日至2019年06月01日收治入院的B-CLPD
研究背景:海水淹溺是海上作业、作战时常易发生的事故,是意外伤害死亡的主要原因。常导致海水淹溺急性肺损伤(seawater drowning induced acute lung injury,SWDALI)。近年来越来越多的证据表明,模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)在慢性阻塞性肺病,尘肺和哮喘等非感染性疾病中都起着关键作用。核苷酸结合寡聚化结构域
目的 髓母细胞瘤(Medulloblastoma,MB)在成人中的发病率较低,约占中枢系统肿瘤的1%。由于缺乏大样本研究,目前针对成人MB的流行病特征及预后相关因素尚无统一全面的认识,没有明确的指南来指导临床治疗方案的选择。本研究基于公共数据库,探究成人MB的流行病学特征,并评估预后相关因素。材料和方法 基于美国国立癌症研究所流行病监督及最终结果资料库(Surveillance,Epidemiol
【目的】本研究旨在探讨驱动基因EGFR(epidermal growth factor receptor,表皮生长因子受体)突变状态与NSCLC(non-small cell lung cancer,非小细胞肺癌)脑转移临床特征的相关性。【方法】回顾性收集福建医科大学附属第一医院2012年11月至2019年6月期间符合纳入标准的有进行EGFR基因检测的NSCLC患者的检测结果及临床资料(包括性别、
目的拟通过术中神经电生理监测技术,探讨经皮穿刺keyhole手术切除椎管内肿瘤的安全性。方法回顾性分析了本单位2013年1月到2016年12月应用keyhole手术切除椎管内肿物的40例患者,经皮穿刺使用2.5 cm工作通道,在显微镜下磨除肿瘤表面所在的半椎板或部分关节突,靠近肿瘤表面切开硬脊膜,暴露肿瘤后切除椎管内肿瘤。使用术中神经电生理监测(Intraoperative Neurophysio
研究背景及目的:近年来,胆红素与糖尿病及其并发症的关系受到关注,本研究的目的在于探讨2型糖尿病患者血清胆红素水平与糖尿病周围神经病变(Diabetic Peripheral Neuropathy,DPN)之间的相关性。方法:回顾性调查福建医科大学附属第一医院内分泌科2015年8月至2019年11月的2型糖尿病患者749名,其中合并糖尿病周围神经病变(DPN组)的患者323名,无糖尿病周围神经病变(
目的:观察溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)患者的临床特点;调查UC患者的治疗依从性和生命质量(Quality of life)。方法:纳入2014年1月至2019年12月在福建医科大学附属第一医院就诊的UC患者,分析临床类型、病变范围、疾病严重程度、肠外表现、并发症、药物使用情况、实验室指标、内镜及病理检查结果等情况;通过问卷调查UC患者的治疗依从性和生命质量。结果:(1
目的:探讨复发性肝癌微血管侵犯(Microvascular Invasion,MVI)的危险因素并构建列线图预测模型。方法:采用回顾性病例对照研究方法,收集2012年1月至2017年12月期间,在福建省立医院肝胆外科因肝癌肝内复发行第二次根治性切除术的95例患者的临床病理资料。病例纳入标准:(1)年龄≥18岁;(2)首发肝癌行根治性切除术,此次复发具有典型肝癌影像学特点,拟行根治性手术治疗;(3)
目的:本研究拟在构建三维口腔黏膜模型(3-dimensional oral mucosa model,3D OMM)的基础上,研究不同成型技术口腔修复高分子材料对口腔黏膜细胞增殖及细胞凋亡和自噬相关标志物表达情况的影响,为临床中口腔修复高分子材料的选择提供实验依据。方法:(1)本研究分别将人牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblasts,HGFs)和人口腔角质细胞(Human