目的：　　前交叉韧带（ACL）损伤是临床上常见的膝关节疾患，常导致膝关节不稳，退行性骨关节炎及半月板等损害。由于其再生能力有限，所以韧带移植是主要的重建手段。临床上常利用自体或异体肌腱及人工材料进行移植或翻修，存在需求量大但来源有限的问题。而目前应用于临床的人工韧带并非生物重建，存在远期易发生蠕变、疲劳及力学失败。正常的韧带-骨结合部表现为典型的四层结构（韧带、纤维软骨、钙化纤维软骨和骨）。传统的单一结构支架材料体内重建后韧带与骨隧道之间是直接连接，由于没有重建韧带-骨结合部的解剖结构，往往导致生物固定失败。本研究拟利用蚕丝编织组织工程韧带支架并分区修饰，使用丝素蛋白、转化生长因子β3（TFG-β3）基因、骨形态发生蛋白2（BMP-2）基因分别修饰支架材料的韧带区、软骨区和骨区。以期接种于三相支架材料上的骨髓间充质干细胞（BMSCs）被诱导分化成成纤维细胞，软骨细胞及成骨细胞，在体内再生韧带-骨结合部，力争实现稳定的生物重建。　　方法：　　1.编织蚕丝网状支架，提取丝素蛋白，利用丝素蛋白、硫酸软骨素、透明质酸钠、羟基磷灰石（HA）及磷脂酰丝氨酸（PS）修饰三相支架，测定支架材料的孔径、表面元素、孔隙率、平衡脱水率、表面粗糙度及生物力学。　　2.负载TGF-β3及BMP-2基因的慢病毒固化在支架的软骨区和骨区。以固化了慢病毒的支架为实验组，未固化慢病毒的支架为对照组。接种BMS Cs后利用荧光显微镜、扫描电镜（SEM）、实时定量PCR（RT-PCR）检测、观察两组支架细胞的增殖、粘附，以及相关基因的表达情况。　　3.构建兔ACL断裂模型，随机植入实验组和对照组，术后4周、8周及12周取材。影像学、组织学及生物力学等方法评价两组支架，对比两组韧带-骨结合部的愈合情况。　　结果：　　1.修饰后支架的孔隙率为78.44±1.75％，含水率为79.72±1.36%；表面元素分析表明B区中的S和Na元素及C区中的Ca元素比A区有显著提高，并且修饰PS后P元素显著提高。表面粗糙度分析表明修饰HA材料的轮廓算数平均偏差显著增加。拉力及疲劳测试表明支架基本能够达到重建兔ACL的要求。　　2.SEM及激光共聚焦显微镜观察BMSCs在支架上有较好的粘附增殖。RT-PCR表明随着时间的增加 B区的软骨细胞特异性基因表达增加，C区的成骨细胞特异性基因表达增加。　　3.Micro-CT检测发现实验组支架内部的骨长入均高于对照组，且C区较为明显。组织学观察可见，对照组的支架与骨之间为纤维结缔组织填充，实验组可见骨样组织、软骨样组织长入支架内部，并成梯度分布，表现出良好的愈合情况。　　结论：　　基因修饰的三相蚕丝韧带具有良好的生物相容性，与未经基因修饰的支架相比能够更好的修复韧带-骨结合部形成仿生的结构，具有良好的应用前景。