不同浓度的角质细胞生长因子(KGF)对大鼠颌下腺细胞增殖作用的研究

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目的:  探讨角质细胞生长因子(KGF)对体外培养颌下腺细胞增殖作用的影响,为进一步构建功能性的颌下腺组织提供依据。  方法:  体外组织块法原代培养7天龄SD大鼠的颌下腺细胞(RSMG-cell),免疫荧光法进行细胞来源鉴定,传代。  将浓度为2.0×104/mL的第2代颌下腺细胞悬液接种于96孔板体外培养,同时进行实验分组。分别加入含5ug/L、10ug/L、15ug/L、20ug/L浓度KGF的培养基作为实验组,同时将加入不含KGF的培养基作为对照组。  倒置相差显微镜定期观察实验组及对照组SD大鼠颌下腺细胞的生长情况和形态变化。MTT法分别检测5组SD大鼠颌下腺细胞的增殖情况。分别取复合培养1、3、5、7、9天的培养上清液,测定淀粉酶含量,检测2组SD大鼠颌下腺细胞的分泌功能。采用SPSS for windows 13.0统计分析软件对结果进行独立样本t检验,检验水准a=0.05,P<0.05认为有显著性差异。  结果:  倒置相差显微镜及荧光显微镜观察,实验组及对照组细胞形态正常,实验组的增殖情况优于对照组。淀粉酶检测提示实验组淀粉酶浓度高于对照组,且相比有明显差异(P<0.05)。MTT检测提示:不同浓度的角质细胞生长因子培养基均可促进大鼠颌下腺细胞的增殖。5μg/L角质细胞生长因子组比其他浓度组细胞数量少(P<0.01),而10,15与20μg/L角质细胞生长因子组的细胞数量相近(P>0.05)。提示不同浓度的角质细胞生长因子,10μg/L角质细胞生长因子可能是促进大鼠颌下腺细胞增殖的最佳培养剂量。  结论:  角质细胞生长因子(KGF)可以促进大鼠颌下腺细胞增殖,10ug/L为最适宜浓度。
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