一株长白山温泉高温菌的分离鉴定及培养条件优化

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lcc54202346
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高温菌,又称嗜热菌,是一种能在高温环境中生存的微生物。在我国主要分布在腾冲热海、长白山温泉等地热资源丰富的地区,具有很高的应用价值和研究价值。大量研究证实了高温菌在食品工业、生物技术领域、污水处理以及矿石脱硫中有着重要的应用。为了发挥和利用高温菌的优势,为其产酶和酶学性质等方面的进一步研究提供理论基础。本研究以长白山温泉泥样为样品,采用微生物分离手段从长白山温泉泥样中分离得到一株高温菌(命名为T1),通过开展生理生化试验和16s rDNA基因序列分析对T1进行鉴定,并对该菌的培养基和培养条件进行了优化。主要的试验结果如下:1.从长白山温泉的泥样中,分离筛选出一株无鞭毛、内生芽孢的革兰氏阳性杆菌,并将其命名为T1;T1的生长温度范围是40-80℃,最适生长温度为65℃;T1的生长pH范围是5.0-8.0,最适起始pH为6.5;T1的NaCl可以抑制菌株生长,最高耐盐量为3g/L。T1可以利用葡萄糖、麦芽糖、果糖、蔗糖以及可溶性淀粉等多种碳源生长,而不能利用纤维二糖;T1的甲基红试验呈阳性,吲哚试验呈阴性,V.P试验呈阳性,接触酶试验呈阴性,淀粉水解试验呈阳性。经过16S rDNA序列分析与系统发育树分析,T1与family Bacillaceae1(芽孢杆菌科)genus Geobacillus属各种之间的同源性最高,与Geobacillus stearothermophilu达到98.3%;T1的DNA的G+Cmol%为44.4%。将T1初步鉴定为一株新菌。2.通过正交试验对T1的基础培养基的氮源、碳源和硫源进行了优化,试验最终确定的T1最优培养基为:酵母浸粉4g/L,胰蛋白胨含量为2g/L,葡萄糖3g/L,硫粉5g/L,硫酸铵1.3g/L,磷酸二氢钾0.28g/L,七水硫酸镁0.25g/L,二水氯化钙0.07g/L,四水氯化锰1.8mg/L,七水硫酸锌0.22mg/L,二水硫酸铜0.05mg/L,氯化钴0.01mg/L。培养基优化后的活菌数为1.5×106cfu/mL。3.通过正交试验对T1的培养条件进行了优化,确定T1最佳培养条件为:培养温度为65℃,起始pH为6.5,装液量为45mL/100mL,摇床转速为150r/min,培养条件优后的活菌数为2.1×108cfu/mL。
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