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目的从pET28a/rSjGST重组质粒中诱导表达rSjGST,过柱纯化。制备针对rSjGST抗原的杂交瘤细胞株,获得其单克隆抗体(McAb),观察重组抗原26ku SjGST及其McAb用于血吸虫病诊断价值。方法用His-Bind Purification Kit纯化rSjGST,以此抗原免疫BalB/C小鼠,6周后用免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行杂交融合,HAT筛选出杂交瘤细胞,经有限稀释法克隆化,扩大培养制备针对rSjGST抗原的单抗细胞株。亲和层析法纯化单抗。ELISA法检测急性血吸虫病患者和非流行区正常人血清。结果成功获得重组26ku SjGST;并筛选出能够长期分泌抗rSjGST单克隆抗体的杂交瘤细胞株;ELISA与Westen-blotting均检测出杂交瘤细胞培养上清中的rSjGST-Ab。ELISA检测32份患者血清结果表明,26ku rSjGST用于急性血吸虫患者血清中抗体检测的阳性率为90.6%;抗rSjGST的McAb用于急性血吸虫患者血清循环抗原检测的阳性率为59.4%。结论rSjGST用于急性血吸虫病患者血清抗体的检测具有良好的免疫反应性;抗r26ku SjGST的McAb检测循环抗原具有早期诊断价值,可作为抗体检测的有效补充。目的研究聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球给药系统在血吸虫病分子疫苗中的应用,并探讨rSj14-3-3,rSjGST及mIL-12作为疫苗的协同作用,及mIL-12刺激机体产生CTL和辅助性T细胞(Th)在抗血吸虫病中的作用。方法从pET28a/Sj14-3-3和GST重组质粒中诱导表达rSj14-3-3及rSjGST,过柱纯化。构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)mIL-12,并共同包入PLGA缓释微球。对制备的微球进行体外释放,观察其释放速度。分组免疫BALB/c小鼠,进行尾蚴攻击感染实验。在攻击感染6wk后,剖杀小鼠,计算各组的减虫率。结果各组的减虫率:单独rSj14-3-3组为27.6%,rSj14-3-3+PcDNA3.1(+)mIL-12组34.9%,rSj14-3-3+PcDNA3.1(+)mIL-12 PLGA微球组37.5%,rSj14-3-3与rSjGST混合后+PcDNA3.1(+)mIL-12 PLGA微球组38.8%;各组减卵率分别为(按以上组序)35.3%,49.1%,50.5%,和43.1%。结论PLGA微球给药系统可诱导并调节体液与细胞免疫从而增强了疫苗的抗感染,抗生殖作用。但rSj14-3-3和rSjGST抗原之间未表现出协同作用。mIL-12刺激机体产生CTL和辅助性T细胞(Th),在BALB/c鼠抗血吸虫攻击感染发挥作用,增强了疫苗保护作用。