中药‘补肾益脑片’抗衰老分子机制研究

来源 :中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nwj9666
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SAMP10/Ta小鼠是衰老加速小鼠(Senescence-AcceleratedMouse,SAM)中的一个纯系,广泛用于抗衰老研究。中药“补肾益脑片”经20多年的临床应用表明其在抗衰老、抗痴呆和改善记忆力方面具有显著效果,但其抗衰老分子机制尚不清楚。本实验应用DDRT-PCR研究“补肾益脑片”提取物对SAMP10/Ta小鼠原代培养的神经细胞基因表达的影响,发现了10个差异表达片段,分别与下列基因或转录产物同源:小鼠mRNA克隆IMAGE4235872,小鼠RIKENcDNAA730024A03基因mRNA,小鼠血清淀粉样蛋白A3(SAA3),异种核蛋白AO(HNRNPAO),小鼠OVCA1(Dph211)mRNA,蛋白酶体26S亚单位,ATP依赖线粒体RNA螺旋酶,小鼠线粒体核蛋白S31(Mrps31),小鼠Cx43gene,小鼠tRNA-Ile.这些片段大部分与衰老相关。从分子水平证明,“补肾益脑片”具有抗衰老作用。 我们发现了感兴趣的片段14-1并获得了其编码序列的全长,其与蛋白酶体26S亚单位的编码序列同源率达99%,但由于其中有6个Gap,导致其翻译的蛋白较蛋白酶体26S亚单位短了38个氨基酸,并且最后13个氨基酸不同。利用生物学软件预测其结构和功能差异,我们发现和蛋白酶体26S亚单位相比,片段14-1翻译的蛋白末端Motif大量减少,亲水性超螺旋和亲水性折叠、Argos跨膜超螺旋、抗原性等都有所改变,等电点升高,其生物学功能是否有变化还有待于进一步的实验证明。 有实验结果提示泛素-蛋白酶体(UP)系统的损坏对衰老和帕金森疾病中神经元退化和死亡有很大贡献。蛋白酶体亚单位结构的改变可能与蛋白酶体年龄相关的活性下降有关,并在衰老中起重要作用。我们的实验结果显示,体外培养两周的神经细胞20mg/ml加药组26S蛋白酶体亚单位显著增加,由于其功能是否改变尚不明确,因此其变化的意义还有待于进一步实验的证明。
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