护心康对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的改善作用及GSK-3β、wnt7a蛋白表达的影响

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:trittt
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目的:探究护心康对Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化的改善作用及对GSK-3β、wnt7a蛋白表达的影响。方法:68只Apo E-/-小鼠,根据小鼠体重、性别,按随机数字表法分为Apo E-/-空白对照组8只,AS模型组60只。造模成功后,再按随机数字表法分为模型组、低、中、高剂量护心康组、阿托伐他汀钙片组、wnt抑制剂组。野生小鼠8只为普通空白对照组。两对照组予以普通辐照饲料喂养,其余均给予高脂饲料喂养(含有脂肪21%,胆固醇0.15%),造模时间为13周。模型成功后,低、中、高护心康组给药量分别为21.6 g/(kg·d)、43.2 g/(kg·d)、86.4 g/(kg·d).阿托伐他汀组为3mg/(kg.d),Wnt抑制剂腹腔注射,2%DMSO+30%PEG300+5%Tween80,200μg/ml,5mg/kg,每两天注射一次,其余相关药物均捣碎后溶于蒸馏水制成混悬液,灌胃体积0.5ml/日,1次/日,连续4周。17周后处死小鼠取材,取小鼠胸主动脉进行斑块分级、HE染色、Masson染色及免疫组化,分别观察其形态学改变及GSK-3β、wnt7a的表达量。结果:1.肉眼观察胸主动脉形态学改变:两对照组其主动脉内膜平整无皱襞、无脂质沉积,平滑肌走行可,无泡沫细胞。模型组主动脉内膜明显增厚,平滑肌走行变样,可见大量泡沫细胞,HE染色可见大量橘红色斑块,Masson染色可见大量绿色胶原纤维,免疫组化可见大量棕色颗粒。他汀组、中剂量护心康组主动脉内膜较两空白对照组增厚,平滑肌走行欠完整,可见部分泡沫细胞。高剂量组内膜较两空白对照组增厚,可见少许泡沫细胞,平滑肌走行欠完整。抑制剂组内膜较其它组增厚少,可见少许泡沫细胞,平滑肌走行有改变。低剂量组护心康和模型组无差别。2.免疫组化法检测护心康对GSK-3β、wnt7a表达的影响。和两对照组比,其余各组GSK-3β、wnt7a灰度值明显降低(p<0.01);和模型组比,中、高剂量护心康组、他汀组、wnt抑制剂组灰度值明显升高(p<0.01);wnt抑制剂组灰度值高于高剂量护心康组(p<0.05);低剂量护心康组和模型组比较无差别;中剂量护心康组和他汀组无明显差别。结论:1.护心康可以抑制动脉粥样硬化斑块的形成。2.护心康可以显著降低wnt7a、GSK-3β蛋白含量,其抗动脉粥样硬化的作用可能与此有关。
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