卵巢癌肿瘤干细胞标志物的表达与临床病理关系的研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aeo55121890
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目的:卵巢上皮性癌(以下简称卵巢癌),是妇科死亡率最高的恶性肿瘤,缺乏早期症状,具有快速增长、繁殖导致腹膜转移的特点,因此患者预后极差,死亡率在宫颈癌和内膜癌之上而位居首位。约70%的患者在诊断卵巢癌时已处于晚期,治疗的方法主要是肿瘤细胞减灭术和顺铂、紫杉醇为主的化疗,复发和耐药始终是导致死亡率居高不下的重要原因。近10年来这种状况未能改善,卵巢癌的生存率仍然很低,已经成为严重威胁广大妇女健康和生命的疾病。随着肿瘤干细胞学说的提出和研究,人们对肿瘤的发生、转移和复发有了新的认识。肿瘤干细胞(cancer stemcells,CSCs)具备以下特征:具有自我更新的能力;高致瘤性;具有多向分化潜能。除此之外,CSCs常处于静止状态,对膜转运蛋白ABCG2、MDR1等表现为高表达以及较强的修复能力,对作用于快速分裂细胞的化疗药物产生抵抗,最终导致临床治疗的失败和肿瘤的复发。CD117是原癌基因kit的受体,在恶性黑色素瘤,肥大细胞性白血病,精元细胞瘤,胃肠道间质细胞瘤,乳腺癌等疾病的发生过程中均起到了非常重要的作用,作为肿瘤干细胞表面标志物越来越受到重视。Nestin(巢蛋白)是神经干细胞的重要标志,近年来在胃肠道间质细胞瘤,恶性胶质瘤,恶性黑色素瘤,横纹肌肉瘤中研究中发现Nestin存在表达,且表达强度与恶性度密切相关,在预测肿瘤预后方面有非常重大的意义。Ki67是一种与细胞增殖密切相关的抗原,与细胞的有丝分裂相关,被认为是细胞增殖的重要标志物,目前已被广泛用于临床及基础研究。本实验以免疫组化方法检测了CD117及Nestin、Ki67在不同卵巢癌组织中的表达情况及它们与临床病理参数之间的关系,探讨以肿瘤干细胞标志物CD117及Nestin为主,辅以Ki67在卵巢癌发生发展及侵袭转移中的作用,为CD117及Nestin、Ki67在卵巢癌早期筛查和临床应用提供有力的理论依据和实验基础。  方法:本研究标本取自白求恩国际和平医院2007年1月-2009年1月间就诊于妇科、初诊的卵巢癌患者50例,术后均经病理确诊,病历资料完整。年龄31-66岁,其中浆液性腺癌25例,宫内膜样癌20例、粘液性腺癌5例。根据国际妇产科联盟(FIGO,2009年)[6]标准分期:Ⅰ期7例,Ⅱ期1例,Ⅲ期35例,Ⅳ期7例。组织分化程度G1、G2、G3分别为9例、25例、16例。按手术后残余肿瘤直径大小分为2组:<1cm的42例,≥1cm的8例,按照关于化疗敏感型卵巢癌、耐药型卵巢癌、复发的定义结合对患者的随访资料,我们将病例资料分为耐药组17例和敏感组33例病历资料完整。所有标本于离体半小时内取材,以10%中性甲醛固定,石蜡包埋,切片备用。应用免疫组化S-P法检测CD117及Nestin、Ki67蛋白在不同卵巢癌组织中的表达情况及其与卵巢癌临床病理特征之间的关系,分析二者之间的相关性。应用SPSS13.0统计学软件对相关数据进行Spearman检验和秩和检验,生存曲线按寿命表法计算,并绘制成Kaplan-Meier图,不同生存曲线的显著性用Log-rank统计学方法对数据进行统计分析。  结果:⑴CD117的表达与卵巢癌临床病理参数之间的关系:CD117的阳性表达率在浆液性腺癌、宫内膜样癌、粘液性腺癌中分别为64.0%、65.0%、60.0%,三者相比无显著性差异(P>0.05);在高分化、中分化、低分化组织中分别为44.4%、65.2%、77.7%,三者相比有显著性差异(P<0.05);在Ⅰ期~Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期中分别为42.9%、67.4%,两者相比有显著性差异(P<0.05),化疗耐药组和化疗敏感组中阳性表达分别为76.5%、33.3%,二者相比有显著性差异(P<0.05),残余肿瘤<1cm与残余肿瘤≥1cm的阳性表达分别为59.7%、87.5%,二者相比有显著性差异(P<0.05)。⑵Nestin的阳性表达率在浆液性腺癌、宫内膜样癌、粘液性腺癌中分别为36.0%、35.0%、40.0%,三者相比无显著性差异(P>0.05);在高分化、中分化、低分化组织中分别为22.2%、34.8%、44.4%,三者相比有显著性差异(P<0.05);在Ⅰ期~Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期中分别为14.3%、39.5%,两者相比有显著性差异(P<0.05),化疗耐药组和化疗敏感组中阳性表达分别为41.2%、18.2%,二者相比有显著性差异(P<0.05);残余肿瘤<1cm与残余肿瘤≥1cm的阳性表达分别为34.8%、42.8%,二者相比无显著性差异(P>0.05)。⑶Ki67的阳性表达率在浆液性腺癌、宫内膜样癌、粘液性腺癌中分别为76.0%、75.0%、80.0%,三者相比无显著性差异(P>0.05);在高分化、中分化、低分化组织中分别为44.4%、78.3%、88.9%,三者相比无显著性差异(P<0.05);在Ⅰ期~Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期中分别为57.1%、79.1%,两者相比有显著性差异(P<0.05),耐药组和药物敏感组中阳性表达分别为75.8%、76.5%,二者相比无显著性差异(P>0.05);残余肿瘤<1cm与残余肿瘤≥1cm的阳性表达分别为32.6%、57.1%,二者相比有显著性差异(P<0.05)。⑷CD117和Nestin蛋白在不同组织类型卵巢病变组织中表达的相关性:在浆液性腺癌、宫内膜样癌、粘液性腺癌各组中,CD117和Nestin的表达均呈正相关关系,等级相关系数rs及P值分别为(rs=0.7794,P<0.01),(rs=0.6014,P<0.01)。⑸通过Kaplan-Meier生存曲线分析CD117和Nestin表达与患者生存率的关系,得出CD117(X2=7.152,P=0.007),Nestin(X2=15.831,P=0.000),CD117和Nestin高表达的患者生存率低,低表达的患者生存率高,有统计学意义,二者相比有显著性差异(P<0.05)。  结论:①CD117和Nestin的表达与卵巢癌的恶性程度有密切关系,CD117和Nestin对卵巢癌的诊断和治疗具有潜在的价值。Ki67可以辅助CD117和Nestin的表达来判定肿瘤的增殖能力,反映肿瘤的生物学行为,对判断卵巢癌患者的预后有重要意义。②对卵巢病变组织中CD117和Nestin表达进行相关性分析,结果表明:在卵巢癌组织中二者表达呈正相关关系。③CD117和Nestin在卵巢癌组织中的表达与患者生存率密切相关,推测CD117和Nestin可能作为反映卵巢癌复发的肿瘤干细胞标记物,以二者为靶点的抗癌治疗可能成为肿瘤治疗的一个新思路。
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