目的：制备小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SMZ)单克隆抗体并建立其免疫学检测方法。 方法：选用经磺胺二甲基嘧啶-牛血清白蛋白偶联物(SMZ-BSA)免疫的Ballb/c小鼠，取其脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞进行细胞融合。用有限稀释法进行一次亚克隆，得到一株特异性分泌SMZ抗体的杂交瘤细胞，定名为4A6E6。通过体内诱生腹水法制备单克隆抗体，收集腹水并进行纯化。利用制备的抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金试纸条、微球-悬液芯片、三种检测SMZ残留的方法。 结果：(1)经纯化后抗体浓度为0.3mg/ml，效价为1：32000。(2)间接竞争ELISA的检测限为0.4ng/ml，IC50为4.6ng/ml，检测范围为1-100ng/ml。与其他药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嗪、磺胺甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲(口恶)唑、庆大霉素)交叉反应率小于0.01％，10ng/ml添加时回收率为86.0％；50ng/ml添加时回收率为96.6％。(3)用该抗体制备的胶体金试纸条检测限为25ng/ml。(4)通过微球-悬浮芯片技术建立的竞争性微球检测方法确定的检测限可达到0.05ng/ml，检测范围为0.1-5ng/ml，10ng/ml添加时回收率为113.9％；50ng/ml添加时回收率为80.5％。 结论：本课题制备的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体特异性强、效价高；使用制备的抗体建立了磺胺二甲基嘧啶牛奶样品中残留检测方法。