目的:急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）是全世界范围内主要致死性疾病之一,通过实施冠状动脉介入术、溶栓、冠状动脉旁路移植术的心肌再灌注疗法,尽可能快的重建心肌血供,已成为挽救AMI患者的共识。心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）是在迅速实施恢复心肌血流灌注时出现的心肌损伤不但不减少,反而加重的一种反常的病理现象。由于在临床治疗的过程中,MIRI的发生很难提前预测,而其一旦发生就将在在很大程度上减少了再灌注疗法的临床获益。因此,如何有效预防或减轻MIRI是临床进行心肌再灌注治疗中的重点和难点。长期以来,氧化应激、钙超载、炎症、细胞凋亡等多种因素被认为参与了MIRI的过程,其中氧化应激是MIRI的发生机制的核心。MIRI过程中,尤其是再灌注早期,心肌细胞会生成大量的活性氧（reactive oxygen species,ROS）。这些生成ROS不仅能造成细胞内的氧化应激状态,同时还可以造成蛋白质、脂质和DNA等大分子结构的破坏,从而导致心肌细胞死亡和心功能障碍。如何抑制MIRI过程中ROS的过量生成及氧化应激的激活越来越受到广大研究者的关注。巴西苏木素（Brazilin）,是从干燥的苏木心材中提取的一种天然高异黄酮类化合物,是苏木主要有效成分之一。经研究发现,其具有较强的抗氧化活性和抑制ROS生成的作用。然而,巴西苏木素是否对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用目前尚未清楚。本研究通过构建大鼠心肌细胞缺氧复氧模型和大鼠离体心脏再灌注模型来观察巴西苏木素对于MIRI的保护作用,揭示其可能的分子机制,为巴西苏木素进一步用于临床防治MIRI提供理论支持。方法:1、造模开始前1小时,给予大鼠心肌细胞（H9c2）不同浓度巴西苏木素预处理。通过三气培养箱将H9c2细胞缺氧6小时,复氧3小时来制备细胞缺氧复氧模型。2、分别应用CCK-8法、比色法和流式细胞术测定心肌细胞存活力、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和乳酸脱氢酶（LDH）释放量和凋亡率的变化。3、心脏离体前1小时,给大鼠通过腹腔注射不同浓度巴西苏木素进行预处理治疗。通过戊巴比妥钠将大鼠麻醉后,开胸将心脏离体后,经主动脉逆行插管将心脏固定在langendorff心脏灌流装置上,灌流条件控制在37℃、75mm Hg灌流压。通过在左心室插入注水球囊来监测不同时间点心功能的变化情况。在心脏灌流平衡10min后,关闭灌流装置,全心停灌30min后打开灌流装置复灌90min,诱导心肌缺血再灌注损伤。4、分别通过TTC染色和TUNEL染色检测心肌梗死面积和心肌凋亡。5、通过ROS敏感性探针检测心肌细胞中ROS含量。比色法检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的变化情况。6、免疫荧光观察核因子E2相关因子2（nuclear factor E2-associated factor 2,Nrf2）核转位情况。7、Western blot检测缺氧复氧心肌细胞中Nrf2、磷酸化Nrf2、PKCε、磷酸化PKCε、HO-1和NQO1的表达。结果:1、巴西苏木素预处理呈剂量依赖性增强缺氧复氧心肌细胞的生存力,减少心肌细胞CK-MB和LDH的释放量。2、巴西苏木素预处理可使缺氧复氧心肌细胞的凋亡率明显下降,同时显著抑制缺氧复氧心肌细胞中cleaved caspase-3的表达。3、巴西苏木素预处理呈剂量依赖性减少离体大鼠心脏的梗死范围和心肌酶的释放量,促进再灌注后心脏功能的恢复。4、巴西苏木素抑制缺氧复氧心肌细胞ROS和MDA的生成,增强SOD和GSH-Px的活性。5、巴西苏木素促进缺氧复氧心肌细胞Nrf2核转位,增强Nrf2下游靶基因（HO-1和NQO1）的表达。6、巴西苏木素可导致PKC和Nrf2的磷酸化水平升高,而PKC抑制剂（Chelerythrine chloride）可阻断巴西苏木素对于Nrf2的激活作用。7、转染Nrf2特异性小干扰RNA（Si-Nrf2）可以取消巴西苏木素对于缺氧复氧心肌细胞的的保护作用。8、Nrf2抑制剂（ML385）可以取消巴西苏木素对于离体心脏缺血再灌注的保护作用。结论:1、巴西苏木素预处理可以减轻MIRI。2、巴西苏木素通过激活PKC,增加Nrf2的磷酸化,诱导Nrf2发生核转位,增强其转录活性,从而抑制缺氧复氧诱导的氧化应激。3、Nrf2参与介导巴西苏木素的心肌保护作用。