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本研究以初始体重为(208±0.3)g的三倍体虹鳟(Oncorhynchus mykiss)为研究对象,分别配制用复合蛋白源(大豆浓缩蛋白、玉米蛋白粉、骨朊粉、血球粉、豆粕组成的复合物)替代0%、25%、50%、75%和100%比例的鱼粉饲料,开展为期84天的养殖实验,采用生理生化及分子生物学技术,探讨复合蛋白源替代饲料中不同水平的鱼粉对三倍体虹鳟生长性能、饲料利用、营养代谢、肝脏健康、肠道健康等方面的影响,以评估不同蛋白源替代鱼粉的适宜比例及相关机理,主要研究结果如下:1.从三倍体虹鳟生长性能角度评价复合蛋白替代鱼粉的潜力经过84天的养殖实验,复合蛋白替代鱼粉后对三倍体虹鳟存活率无显著影响(P>0.05)。与全鱼粉组相比,75%替代组三倍体虹鳟粗蛋白含量、肥满度显著高于全鱼粉组、25%和50%替代组(P<0.05);复合蛋白替代鱼粉后显著增加了三倍体虹鳟的肠长指数(P<0.05)。2.从三倍体虹鳟营养物质消化、吸收、代谢角度评价复合蛋白替代鱼粉的潜力(1)营养物质消化方面:与全鱼粉组相比,随着复合蛋白替代比例的增加,三倍体虹鳟幽门垂和肠中蛋白酶活性显著降低(P<0.05);25%替代组和50%替代组胃蛋白酶活性显著低于全鱼粉组和100%替代组(P<0.05);胃、幽门垂和肠道中100%替代组脂肪酶活性最高(P<0.05);全鱼粉组肠中淀粉酶活性显著高于其他替代组(P<0.05)。(2)营养物质吸收方面:与全鱼粉组相比,蛋白质吸收基因pept1表达量在75%替代组最低;糖类吸收基因glut2的表达量在75%替代组基因表达量最低。(3)营养物质代谢方面:100%替代组谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性最高(P<0.05);复合蛋白不同替代水平对肝脏m TOR蛋白及其磷酸化表达水平无显著影响,而对肝脏中S6K1蛋白及其磷酸化表达水平有显著影响(P<0.05),4EBP1总蛋白水平和磷酸化水平在50%替代组达到最大值。脂代谢分解基因Cpt1、hoad在肝脏中的表达量呈先升高后降低的趋势(P<0.05),脂肪代谢合成基因atgpat在肝脏中的表达量呈上升趋势(P<0.05)。糖分解代谢基因Gyp、GK、PK在肝脏中的表达量呈逐渐降低的趋势;糖合成基因Gys、Fbpase在肝脏中的表达量呈逐渐降低的趋势(P<0.05)。3.从三倍体虹鳟肝脏健康角度评价复合蛋白替代鱼粉的潜力(1)组织形态方面:肝细胞空泡化在50%和75%替代组空泡化程度最低;(2)抗氧化指标和肝损伤指标方面:复合蛋白替代组血浆谷丙转氨酶活性显著高于全鱼粉组(P<0.05);三倍体虹鳟血浆谷草转氨酶活性显著增加(P<0.05);100%替代组肝脏丙二醛含量最高(P<0.05)。(3)抗氧化相关基因表达情况:抗氧化基因GPX、Nrf2在肝脏中的表达量呈先升高后降低的趋势(P<0.05),CAT基因表达量呈降低趋势(P<0.05),SOD基因表达量在100%替代组最高(P<0.05);(4)炎症相关基因表达情况:与全鱼粉组相比,肝脏组织中抗炎基因IL-10r1,IL-4Rα1,IL-6相对表达量呈逐渐下降的趋势(P<0.05),IL-4R2在25%替代组表达量最高(P<0.05);肝脏中促炎基因IL-12B2P40b、IL-12P35b、IL-8、IL-12P40a、IL-12P40b表达量呈先降低后升高的趋势(P<0.05),IL-12p35α2、IFN基因表达量呈逐渐降低的趋势(P<0.05),Tnf-α、IL-1β基因表达量呈先升高后降低的趋势(P<0.05)。4.从三倍体虹鳟肠道健康角度评价复合蛋白替代鱼粉的潜力(1)肠道组织形态方面:三倍体虹鳟肌层厚度、微绒毛高度50%替代组值最高(P<0.05)。全鱼粉组和100%替代组肠道杯状细胞个数显著小于其余替代组;(2)抗氧化指标:全鱼粉组肠道丙二醛含量最高(P<0.05);全鱼粉组肠道总抗氧化力水平最高显著高于75%替代组(P<0.05);(3)抗氧化基因表达情况:与全鱼粉组相比,随着复合蛋白替代比例的升高,肠道中SOD、CAT、Nrf2基因表达量呈逐渐上升的趋势(P<0.05);(4)炎症基因表达情况:与全鱼粉组相比,肠道抗炎基因IL-10r1、IL-4R2、IL-4Rα1、IL-6基因表达量在100%替代组表达量最高(P<0.05);促炎基因IFN基因表达量在100%替代组表达量最高(P<0.05)。总之,通过生长性能、饲料利用、肝脏和肠道健康等指标表明,复合蛋白替代鱼粉最高比例可达75%,而100%替代水平在肝脏和肠道健康方面存在潜在风险。