论文部分内容阅读
钙调蛋白被认为在贝壳和珍珠形成过程中的钙代谢过程中扮演重要的角色,可能参与贝壳和珍珠形成的矿化过程,但到目前为止,钙调蛋白在调节淡水贝类特别是池蝶蚌的钙代谢过程中具体行使的功能尚不明确,因此,本实验通过对钙调蛋白功能的进一步研究来了解和探索其在池蝶蚌贝壳和珍珠形成过程中的作用,本研究主要内容及结果如下:1、QRT-PCR结果表明:池蝶蚌CaM在4月底、8月底和9月底表现出表达高峰;有核手术后第8天,CaM mRNA表达水平在珍珠囊中有明显增强,而无核手术后第8天,CaM mRNA表达水平在外套膜中有明显增强;同时本实验结果还发现,有核和无核手术后的第120天,珍珠囊组织中CaM mRNA的表达量都有不同程度的上升。两种植核手术后CaM mRNA在外套膜及珍珠囊中的表达量均基本低于对照组外套膜的表达量。2、构建了原核表达载体并进行钙调蛋白诱导表达,亲和层析纯化后获得了钙调蛋白纯化产物,并将其作为抗原免疫家兔,成功制备了多克隆抗体。免疫荧光定位结果显示:池蝶蚌CaM大量分布在外套膜的内外表皮组织、正在发生增殖和迁移的供体细胞小片的表皮组织、珍珠囊上皮组织以及肌肉纤维上。