广西产龙利叶根质量分析与抗炎药理作用研究

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目的:以龙利叶Sauropus rostratus Miq.的根为研究对象,对其进行理化鉴别的研究,建立广西龙利叶根的高效液相色谱指纹图谱,得到参照图谱,为科学评价和有效鉴别龙利叶根药材提供新方法。通过对其水提物的急性毒性、抗炎作用的药效学研究,为今后开发、合理利用该药用资源提供科学依据。  方法:  1.采用化学系统预实验的方法对龙利叶中可能存在的成分进行化学实验。  2.采用薄层色谱法对其进行定性鉴别的研究。  3.采用UV-vis法分别对其石油醚、氯仿、95%乙醇和水提取液进行紫外光谱鉴别的研究。  4.采用IR法分别对10批不同产地的龙利叶根药材粉末进行光谱定性分析。  5.对比不同提取溶剂、不同提取方法所获得的指纹图谱,选择图谱显示化学成分较多,提取率较高的方法作为提取条件。选用合适的色谱柱及检测波长,优选流动相的组成、配比、流速和柱温,使色谱符合指纹图谱的要求。对广西不同产地的龙利叶根药材10批,进行指纹图谱分析。建立广西龙利叶根的HPLC指纹图谱。  6.采用改良寇氏法对龙利叶根的水提取物进行了急性毒性试验,测定其半数致死量。  7.采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响和棉球致小鼠肉芽肿等模型,观察龙利叶根水提液的抗炎作用。  结果:  1.化学成分预试:根中可能含有有机酸类,糖类,黄酮类,酚类,强心苷,甾醇,生物碱等化学成分。  2.薄层色谱中,用三种不同溶剂展开得到的样品斑点均与对照药材有较好的对应,且三种溶剂分离效果都较好。  3.龙利叶紫外-可见光谱具有一定的光谱特征。  4.建立的广西龙利叶根药材红外指纹图谱可以应用于评价龙利叶药材的真实性、优良性和稳定性,可以较好的评价龙利叶药材的质量。  5.建立广西龙利叶根水提取物高效液相色谱指纹图谱,可较完整地反应龙利叶内在化学信息,全面评价龙利叶的质量。采用梯度洗脱高效液相色谱法对获取的指纹图谱数据进行相似度分析,建立了龙利叶的指纹图谱。10批龙利叶根药材指纹图谱相似度较好,各批药材与对照指纹图谱间的相似度均在0.8以上。  6.龙利叶根水提物的LD50为152.24g/kg,LD5095%的可信限149.17~155.35g/kg。  7.龙利叶根水提物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响及棉球致小鼠肉芽肿等炎症模型均有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01)。  结论:对广西龙利叶根进行性状和理化鉴别研究,建立了广西龙利叶根药材的HPLC指纹图谱,并得到对照指纹图谱,其检测方法重现性和精密度良好,可用于广西龙利叶根药材的鉴别,并有助于其GAP规范种植与质量控制。龙利叶根的水提物为低毒性,对急、慢性炎症均有明显的拮抗作用。该药理学研究为充分合理开发利用龙利叶提供了科学依据。
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