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目的探讨在大鼠心脏移植缺血再灌注损伤(Ischemia-Reperfusion injury,IRI)过程中血清和糖皮质激素调节激酶1(Serum-and glucocorticoid regulated kinase 1,SGK-1)的表达变化;研究SGK-1是否参与心脏移植IRI所引起的心肌细胞凋亡;分析地塞米松能否改变SGK-1的表达,能否起到保护心脏移植IRI心肌细胞的作用。方法1、通过大鼠颈部异位心脏移植方法,建立大鼠同异基因心脏移植组(Syngeneic heart transplantation SHT/Allogeneic heart transplantation AHT,SHT组Lewis(Lew:RT11)移植到Lewis(Lew:RT11)大鼠);AHT组:Wistar(WF:RT1u)移植到Lewis(Lew:RT11)大鼠)IRI模型,部分供体在心脏移植前预先用不同浓度的地塞米松(0.05,0.5,and 2mg/BWkg)预先处理。2、通过RT-PCR方法,分析SGK-1 mRNA在AHT/SHT组IRI过程中表达变化。3、利用免疫组化学方法(Immunohistochemistry)、蛋白印记方法(Western Blot)、免疫荧光共定位染色法方法(Double Immunofluorescent Staining),分析在AHT/SHT组IRI过程中SGK-1表达变化、组织分布、细胞定位情况。4、利用免疫荧光共定位染色法方法,研究分析SGK-1表达变化与免疫细胞、细胞凋亡相关Marker之间的关系。5、通过HE染色方法,观察大鼠心脏移植术后急性排斥反应及心脏移植IRI心肌细胞的病理变化过程。6、通过统计学法方,综合分析实验数据并得出统计学结论。结果1、大鼠AHT/SHT组IRI模型中,通过RT-PCR、蛋白印记等实验方法,发现SGK-1在mRNA及蛋白质水平都发生了表达改变。在术后1 h,mRNA及蛋白质表达开始升高,6 h升高明显,12 h达到表达高峰,24 h后恢复到接近6 h表达水平。2、通过免疫组化结果,我们分别在AHT/SHT组移植物的心肌细胞上观察到SGK-1阳性细胞的表达,通过免疫荧光共定位染色结果,进一步明确了SGK-1在心肌细胞中表达,且表达趋势与蛋白印记结果具有一致性。3、通过免疫荧光共定位染色结果,我们发现SGK-1与急性排斥相关Marker之间没有明显的共定位现象。而与凋亡Marker之间存在共定位现象。4、通过蛋白印记、免疫组化、免疫荧光等实验分析发现:地塞米松预处理后SGK-1的表达明显比未用地塞米松处理组高。5、HE染色显示:地塞米松预处理后心脏移植IRI所引起的心肌细胞损伤明显减少。结论1、SGK-1在心脏移植后表达上调,且主要定位于心肌细胞中。2、SGK-1参与了心脏移植IRI引起的心肌细胞凋亡过程,并起到抗心肌细胞凋亡的作用,其可能机制与NF-kB凋亡途径相关。对SGK-1的深入研究可为今后抑制心脏移植IRI心肌细胞凋亡提供有效的作用靶点。3、地塞米松能够增加SGK-1的表达并起到减少心肌细胞损伤的作用。这将可能为减少IRI后心肌细胞的凋亡提供一个新的理论依据并将成为新的治疗靶点。