N-cadherin在肝门部胆管癌组织中的表达及意义

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目的:探讨神经型钙黏附分子(N-cadherin)在肝门部胆管癌组织中发生发展中的作用,明确在肝门部胆管癌组织、癌旁组织及正常胆管组织中的表达及意义,并判断其是否可作为肝门部胆管癌(Hilar cholangiocarcinoma,HC)浸润转移和预后的预测指标。方法:收集我院2006年至2011年行手术切除的肝门部胆管癌患者癌组织及癌旁组织的石蜡标本各20例,及近期我院因肝海绵状血管瘤而手术切除的肝脏内无病变的正常胆管组织的石蜡标本20例。癌旁组织均为癌周、病理确认未受癌组织浸润的胆囊、肝脏、网膜、肝圆韧带或淋巴结。应用免疫组织化学S-P法检测N-cadherin在肝门部胆管癌组织(20例)、癌旁组织(无肿瘤浸润)(20例)及正常胆管组织(20例)中的阳性表达情况,其中,用于免疫组织化学实验腺癌15例,粘液腺癌2例,管状腺癌3例;淋巴结转移8例;神经浸润16例;根据TNM分期:Ⅰ期4例,Ⅱ期2例,Ⅲ期8例,Ⅳ期6例。所有患者术前均未接受过放疗、化疗及生物免疫治疗。应用人工计数的方法对三组免疫组化结果进行分析,进一步采用Image-pro plus (IPP6.0)图像定量分析软件对N-cadherin表达强度进行图片定量分析,并用平均光密度值反应其阳性表达强度,较人工计数更客观的比较三组之间是否存在差异,更进一步证实免疫组织化学实验结果的可靠性。同时运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测N-cadherin在肝门部胆管癌冰冻组织(10例)及癌旁冰冻组织(6例)中的差异,冰冻组织选择均为免疫组织化学中所包含的病例,且癌旁组织均为无肿瘤浸润的胆囊,并对所得的条带及所选内参条带的灰度比值进行统计学分析。结果:利用人工计数方法分析免疫组织化学病理切片后,N-cadherin因子阳性表达对比,均有统计学意义。N-cadherin在肝门部胆管癌、癌旁组织及正常胆管组织中的阳性率分别为80%,20%和0%。其中,正常胆管组织与癌组织进行对比:X2=26.667,P<0.01,差异有显著性;癌旁组织与癌组织进行对比:X2=14.400,P<0.01,差异有显著性。实验结果显示:N-cadherin的表达与肝门部胆管癌组织的分化程度、TNM分期及有无神经浸润密切相关,差异有统计学意义,即P<0.05;与患者的年龄、性别、组织学类型及有无淋巴结转移无关,即P>0.05。图像定量分析结果显示:癌组织与癌旁组织平均光密度差异有统计学意义(P<0.01),癌组织与正常胆管组织平均光密度差异有统计学意义(P<0.01),癌旁组织与正常胆管组织平均光密度差异无统计学意义(P=0.349)。RT-PCR结果显示:N-cadherin在癌组织及癌旁组织中mRNA含量的差异有统计学意义(P<0.01)。结论:N-cadherin表达的升高可作为评估肝门部胆管癌浸润转移及预后的的指标。
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