中医时辰理论指导肺癌Ⅰ号方式与环磷酰胺联合用药对小鼠Lewis肺癌疗效影响的实验研究

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目的:在中医时辰理论“旦慧昼安夕加夜甚”和“肺经旺于寅时”的指导下,探讨不同时辰以中药肺癌Ⅰ号方和环磷酰胺(CTX)联合用药对Lewis肺癌小鼠的疗效进行实验研究。为进一步提高中西医联合用药的疗效提供实验依据,也是对中西医结合方式的实验研究进行探索。   方法:复制Lewis肺癌小鼠模型,造模成功后,将Lewis肺癌小鼠随机分为荷瘤对照组、亥时治疗组、寅时治疗组和巳时治疗组共四个组。根据开展实验的昆明地区与北京地区有1小时09分的时差,因此,亥时治疗组给药时间为22:09-00:09;寅时治疗组给药时间为04:09-06:09;巳时治疗组给药时间为10:09-12:09。除荷瘤对照组外,其余各治疗组在不同时辰每天用肺癌Ⅰ号方灌胃1次,在不同时辰每3天用CTX腹腔注射1次。给药后测实验动物的饮水饮食量,并观察活动变化。用药12天后处死实验动物取标本,检测端粒酶活性和凋亡率,比较各组瘤重和抑瘤率,并进行病理组织学检查。   结果:⑴Lewis肺癌接种6天后,小鼠右侧前肢腋下皮下可触及米粒大小肿瘤块,标志造模成功。⑵瘤重与抑瘤率:各治疗组平均瘤重均低于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P<0.01);巳时治疗组组平均瘤重明显低于亥时治疗组,差异有统计学意义(P<0.01);巳时治疗组组平均瘤重明显低于寅时治疗组,差异有统计学意义(P<0.01);亥时治疗组平均瘤重略低于寅时治疗组,差异无统计学意义(P>0.05)。抑瘤率的比较,巳时治疗组抑瘤率为63.39%;亥时治疗组抑瘤率为39.16%;寅时治疗组抑瘤率为33.52%,巳时治疗组抑瘤作用最强。⑶端粒酶活性检测:巳时治疗组端粒酶Ct值高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P<0.01);亥时治疗组端粒酶Ct值高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P<0.01);寅时治疗组端粒酶Ct值高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。各治疗组组间比较差异不大,无统计学意义(P>0.05)。⑷凋亡率检测:巳时治疗组凋亡率高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P<0.01);亥时治疗组凋亡率高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P<0.01);寅时治疗组凋亡率高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。巳时治疗组凋亡率高于亥时治疗组,差异有统计学意义(P<0.05),巳时治疗组凋亡率高于寅时治疗组,差异有统计学意义(P<0.05),亥时治疗组和寅时治疗组凋亡率差异不大,无统计学意义(P>0.05)。⑸病理组织学观察:光镜下,各组细胞大小不一,细胞核大深染,异型性明显,可以确认为肿瘤细胞。各治疗组与荷瘤对照组比较,肿瘤细胞密度下降,坏死面积增加,间质浸润的炎细胞增多,各治疗组之间差异不明显。   结论:①通过各治疗组与荷瘤对照组各项指标的比较,再次证明中药肺癌Ⅰ号方与化疗药物环磷酰胺(CTX)合用对Lewis肺癌小鼠有一定的疗效。②瘤重、抑瘤率和凋亡率这3项指标检测结果显示,巳时治疗组优于亥时治疗组和寅时治疗组,提示中医时辰理论“旦慧昼安夕加夜甚”对中西医联合用药的临床治疗可能有一定的指导作用。③寅时治疗组的各项指标未优于巳时治疗组和亥时治疗组,提示中医时辰理论“肺经旺于寅时”对非肺经部位(皮下)接种的Lewis肺癌小鼠模型无明显影响。④通过本实验,用中医时辰理论指导中西医联合用药,对中西医结合方式的实验研究进行了有效的探索。
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