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Twist1基因是1987年Thisse B等首先在果蝇中发现的一个新基因。在脊椎动物中,Twist有两种,Twist-1 and Twist-2,他们编码的蛋白有共同的bHLH域但是在NH2末端不同。Twit1又经常称做Twist。Twist1蛋白是属于碱性的螺旋-环-螺旋蛋白家族中的高度保守的转录因子,在胚胎的发生发展中发挥重要作用。此外Twist1被认为是癌基因,影响肿瘤细胞凋亡、耐药等,而且作为上皮间质转换(iepithelial.Mesenchymal transition,EMT)过程中的关键调控因子,Twist1对肿瘤的侵袭和转移有重要影响。到目前为止,其促肿瘤作用报道多局限于实体瘤,与造血系统恶性肿瘤的关系尚不明确。
我室前期工作发现,Twist1在慢性粒细胞白血病和急性髓系白血病患者高表达,促进白血病细胞集落形成、耐药、迁移和体内增殖,提示Twist1可能与白血病发生发展有密切关系。为了进一步研究Twist1基因在白血病发生和发展中的作用及其对正常造血的影响,我们构建了过表达小鼠Twist1基因(mTwist)的逆转录病毒载体MSCV-mTwist—IRES-GFP,将mTwist表达于小鼠Lin-骨髓单个核细胞,通过集落培养、Serial replating、Transwell试验和小鼠尾静脉骨髓移植研究Twist1在造血系统中的功能。
结果发现,过表达mTwist小鼠Lin-骨髓细胞集落能够传代到第5代,而空载体对照组只能传代到3-4代；在第1-2代集落传代时过表达mTwist小鼠Lin-骨髓细胞集落形成能力显著低于空载体对照组(P<0.05),而第3-5代集落传代时mTwist小鼠Lin-骨髓细胞集落形成能力显著高于空载体对照组(P<0.05)。过表达mTwist的小鼠Lin-骨髓细胞迁移能力显著高于MSCV-V对照(P<0.05)。过表达mTwist细胞与空载体对照组均未检测到明显凋亡(P>0.05)。移植过表达mTwist小鼠Lin-骨髓细胞的小鼠未出现典型的白血病表型。
上述结果提示,过表达mTwist对小鼠造血产生影响。mTwist促进小鼠Lin-造血细胞集落传代,显著促进骨髓细胞迁移,不影响细胞凋亡。单独过表达mTwist一个基因不足以引起小鼠白血病的发生。