目的:血吸虫病导致的组织虫卵肉芽肿和纤维化其重要的病理损害。在血吸虫感染早期,机体主要表现I型免疫反应,自成虫产卵开始免疫反应向II型偏移,但具体的分子机制尚不明确。研究发现同种异体移植物炎症因子1（AIF-1）可参与多种炎症性病变,并可调节I型/II型免疫反应平衡。本课题组前期研究发现在血吸虫感染小鼠模型中,给予AIF-1多肽可以导致慢性期肝脏纤维化病变减轻。为了证实AIF-1可以通过调节I型/II型反应平衡而参与血吸虫感染小鼠肝脏病变的发展。本研究拟阐明AIF-1对血吸虫感染小鼠I型/II型免疫反应的影响及机制。方法:本研究通过构建AIF-1转基因小鼠(AIF-1^Tg),经腹部感染血吸虫尾蚴25条/鼠,建立AIF-1^Tg和野生小鼠（WT）感染模型。感染后8周解剖小鼠分别计数虫荷、单条雌虫产卵量,以及血清中ALT和羟脯氨酸水平。在感染后8周、14周取肝组织进行H&E和Masson染色观察肝脏肉芽肿和纤维化病变情况。在感染后4周、8周、14周分出脾脏中单个核细胞,采用荧光抗体CD3、CD8、IFN-γ/IL-4标记细胞。流式细胞术检测CD3⁺CD8^-IFN-γ⁺和CD3⁺CD8^-IL-4⁺。提取脾淋巴细胞的RNA,Real-time PCR检测中转录因子T-bet和GATA-3的表达。培养脾淋巴细胞,72小时后分离上清,用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ和IL-4的表达。为了进一步研究AIF-1对巨噬细胞分化的影响。在感染后8周处死小鼠分离腹腔巨噬细胞和肝脏巨噬细胞,分别用荧光抗体F4/80、CD16/32、CD206标记细胞,流式细胞术检测M1/M2的细胞数量（F4/80⁺CD16/32⁺和F4/80⁺CD206⁺）。在AIF-1多肽、LPS、SEA刺激下培养RAW264.7细胞,48h后分离上清和细胞,ELISA检测上清中TNF-α和TGF-β的表达水平。提取细胞的RNA和蛋白,Real-time PCR检测不同刺激条件下iNOS和Arg-1的表达水平。进一步提取细胞核蛋白,Western blot检测胞浆中P38 MAPK、p-P38和核蛋白中NF-κB的表达。结果:相对于WT小鼠,AIF-1^Tg小鼠在感染后8周虫荷和肝脏虫卵数量无明显变化,但感染后8周和14周,AIF-1^Tg小鼠的肝脏虫卵肉芽肿面积减小,肝纤维化程度减轻。流式细胞术检测发现,相对于对照组,AIF-1^Tg小鼠在血吸虫感染后4周脾脏CD3⁺CD8^-IFN-γ⁺细胞数量增加,感染后8周脾脏CD3⁺CD8^-IL-4⁺细胞数量下降,其余时间点两组则无明显差异,而计算CD3⁺CD8^-IFN-γ⁺/CD3⁺CD8^-IL-4⁺比例显示AIF-1^Tg小鼠脾脏Th1/Th2细胞相对比例在感染后4周和8周明显升高,感染后14周无差异;Real-time PCR检测脾细胞中T-bet和GATA-3的水平发现血吸虫感染后在4周和8周AIF-1促进T-bet的表达,抑制GATA-3的表达。ELISA检测SEA刺激脾细胞72h后培养上清中IFN-γ的水平,发现在感染后4周AIF-1^Tg组IFN-γ表达升高。在感染后8周,AIF-1^Tg小鼠腹腔和肝脏巨噬细胞中M1细胞数量明显高于WT小鼠,而M2细胞则明显降低。在体外实验中,ELISA检测显示AIF-1刺激RAW264.7产生TNF-α和TGF-β,但TGF-β的水平低于SEA刺激下TGF-β的升高水平。Western检测RAW264.7在AIF-1刺激下P38、p-P38、NF-κB的表达水平显示,AIF-1对P38的表达无影响,但能促进p-P38、NF-κB的表达升高。结论:AIF-1在血吸虫感染早期和急性期可以促进Th细胞反应向Th1极化,并通过活化P38 MAPK/NF-κB通路促进巨噬细胞向M1极化。因此,在血吸虫感染后,AIF-1可以影响I型/II型反应的平衡,并通过促进机体I型免疫应答参与血吸虫病肝脏病理改变。