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甲烷是瘤胃微生物发酵过程中产生的正常代谢产物，其排放不仅加剧了温室效应，而且降低了饲料利用率，因此反刍动物甲烷调控备受关注。本试验研究低剂量的茶皂素、硝酸钙和硫酸镁单独或联合添加对生长初期湖羊甲烷生成和饲料消化率的影响，并利用生长末期的瘘管湖羊从瘤胃发酵、瘤胃微生物菌群变化和瘤胃代谢物角度探讨茶皂素、硝酸钙和硫酸镁单独或联合添加影响反刍动物甲烷生成的可能机制。 试验一茶皂素、硝酸钙和硫酸镁对生长初期湖羊瘤胃甲烷生成及消化功能的影响 选择健康的3月龄体况相近的湖羊30只，随机分为四组:对照组(C)、茶皂素组(T)、茶皂素和硝酸钙组(TN)、茶皂素、硝酸钙和硫酸镁组(TNS)（对照组为6只，三个处理组各8只）。茶皂素、硝酸钙和硫酸镁的添加量分别为0.5g/L、5mM和5mM。对照组和茶皂素组额外添加尿素以保证各处理组间曰粮氮一致。控制潮羊精料和羊草采食量。整个试验期6周，其中预试期2周。正试期第三周时，连续一周记录采食量、收集全部粪便，用于干物质消化率的测定。试验期最后两天用呼吸代谢笼测定甲烷。正式试验开始前和试验结束后连续两天称湖羊体重。结果发现，与对照组相比，添加T、TN和TNS对湖羊的干物质采食量(P＞0.05)、相对增重（P＞0.05）、干物质消化率（P＞0.05）、粗蛋白降解率（P＞0.05）、中性洗涤纤维消化率(P＞0.05)和酸性洗涤纤维消化率(P＞0.05)均没有影响;显著降低生长初期湖羊甲烷的生成量(P＜0.01)，每千克干物质采食量所产生的甲烷量分别降低了46.5％、53.5％、48.4％。 试验二茶皂素、硝酸钙和硫酸镁对生长末期湖羊瘤胃甲烷生成的影响及其作用机制 一荼皂素、硝酸钙和硫酸镁对生长末期湖羊瘤胃甲烷生成及消化功能的影响 选用6头12月龄体况相近的瘘管湖羊，开展重复取样试验，研究茶皂素单独添加、茶皂素与硝酸钙或茶皂素、硝酸钙和硫酸镁联合添加对生长末期瘤胃甲烷生成和干物质消化率的影响。试验以基础曰粮为对照组(C)，设T、TN、TNS三个处理组，分别在基础日粮的基础上添加0.5g/L茶皂素三周(T)后添加5mM硝酸钙三周(TN)，再补以5mM硫酸镁三周(TNS)。每周都用呼吸代谢笼进行甲烷的测定。每个处理组第三周时连续一个星期记录采食量、收集全部粪便，用于干物质消化率的测定。每个处理开始和结束时取晨饲前湖羊瘤胃液用于瘤胃发酵及微生物评定。试验结果显示，与对照组相比，添加T、TN和TNS对湖羊干物质采食量（P＞0.05）、相对增重（P＞0.05）、干物质消化率(P＞0.05)、中性洗涤纤维消化率（P＞0.05）和酸性洗涤纤维消化率（P＞0.05）均没有影响，但抑制粗蛋白的降解（P＜0.01）。各组内的处理时间对甲烷生成没有影响，与对照组相比，每周测定的甲烷生成量，T组分别降低了5.5％、2.8％、5.0％，TN组分别降低了12.7％、16.0％、12.7％，TNS组降低了6.6％、11.0％、6.6％，添加TN抑制湖羊甲烷生成的效果最佳。 二茶皂素、硝酸钙和硫酸镁对生长末期瘤胃发酵、瘤胃微生物数量和瘤胃代谢途径的影响 饲养试验中采取的瘤胃液样品用于瘤胃发酵和瘤胃微生物数量的分析。结果显示，与对照组相比，添加T不影响瘤胃pH，TN显著升高瘤胃pH，TNS显著降低瘤胃pH，但各组瘤胃pH均处于正常范围内;T组和TN组的NH3-N浓度分别降低了25.3％和23.8％，TNS组的NH3-N浓度没有显著影响，但均达到满足瘤胃微生物蛋白合成所需的浓度(＞8.5mg/dL);添加T和TN不影响瘤胃的总挥发性脂肪酸(TVFA)，而TNS组的TVFA降低了13.3％;添加T、TN或TNS不影响瘤胃乙酸的浓度（P＞0.05）;T组和TN组的丙酸浓度没有明显变化，TNS组的丙酸浓度显著下降(P＜0.01);添加T和TNS均显著抑制丁酸的浓度（P＜0.01），TN对丁酸没有影响。 采用实时定量荧光PCR测定瘤胃内总菌、原虫、甲烷菌、真菌和纤维分解细菌的数量。结果显示，T组和TN组的总菌数量没有变化，TNS组的总菌的数量显著减少(P＜0.01)。T、TN或TNS对纤维分解细菌有抑制作用，T和TN显著抑制产琥珀酸丝状杆菌（F.succinogens）的数量，TNS显著抑制溶纤维丁酸弧菌（B.fibrisolvens）的数量。T、TN或TNS对瘤胃原虫和甲烷菌均无影响。T组的真菌数量有小幅度增加，而TN组和TNS组的真菌数量显著增加(P＜0.05)。 添加T、TN和TNS影响瘤胃代谢物的表达量，影响亚油酸代谢、亚麻酸代谢和氨基酸生物合成。 综上所述，添加T、TN和TNS对湖羊干物质采食量、相对增重、干物质消化率均无影响;均减少甲烷生成，TN抑制甲烷的效果最佳。添加T和TN对瘘管湖羊的TVFA没有影响，TNS显著抑制TVFA的浓度。添加TN和TNS增加瘤胃真菌数量;添加T、TN和TNS抑制纤维分解细菌的数量。添加T、TN和TNS影响亚麻酸和亚油酸代谢、氨基酸生物合成，推测T、TN或TNS对反刍动物甲烷的抑制作用是基于其对不饱和脂肪酸代谢途径的改变间接产生的。