研究背景全球精神疾病发病率的飙升导致抗精神病药物的滥用。非典型性抗精神病药物奥氮平(Ola),临床广泛应用,但可致下丘脑-垂体轴生殖内分泌紊乱综合征高泌乳素血症(HPRL)及肝损伤。其病理机制仍大多未明。近年研究证明,除多巴胺D2受体(D2R)外,转化生长因子(TGF-β1)系统信号也与垂体泌乳素(PRL)的分泌密切相关。此外,各种原因可致抗炎因子烟碱乙酰胆碱受体(α7nAchR)信号受损,引起肝损伤。因此,TGF-β1、α7nAchR信号被认为是治疗HPRL和肝损伤的重要新靶点。经典古方芍药甘草汤治疗HPRL和肝损伤有效。我们也已证明,含芍药甘草汤的南方医院制剂抑乳调经颗粒防治HPRL疗效显著,且芍药的主要活性成分之一芍药苷(PF)可抑制泌乳素瘤细胞分泌PRL。但其作用机理仍需深入研究。目的基于TGF-β1和α7nAchR信号通路,探讨O1a所致HPRL和肝损伤的分子病理机制及PF的干预,为防治Ola所致副作用及PF的治疗提供科学依据。方法1.动物研究雌性SD大鼠随机分成5组:空白对照(control)组、Ola组、Ola+溴隐亭(Bro)组、Ola+PF 低剂量(10 mg/kg)组及 Ola+PF 高剂量(50 mg/kg)组。除control组外,每天灌胃Ola,2 h后给药治疗。第12周取血测定相关指标。第13周注射胰岛素,10 min后处死大鼠,取垂体、下丘脑和肝脏,分别处理后作病理检查和脂质含量、蛋白及基因表达。2.细胞研究CCK-8法测定药物对MMQ细胞的毒性,选择适当浓度进行相关实验。各药处理细胞,培养24 h后,取培养液测定PRL含量,提取细胞蛋白检测基因/蛋白表达。3.检测方法酶法测定血液相关生化指标,ELISA法测定PRL和TGF-β1浓度,HE染色观察肝脏病理变化,油红染色法测定肝脏脂滴含量,Real-time PCR和Western blot法测定基因和蛋白表达。结果1、Ola升高大鼠血浆PRL值(P<0.05),增加下丘脑及垂体PRL蛋白表达(P<0.05),同时下调垂体、下丘脑D2R、TGF-β1及其下游信号蛋白表达(P<0.05),但对血浆TGF-β1浓度和肝脏TGF-β1相关信号蛋白表达无影响。高剂量PF改善Ola所致异常。MMQ细胞实验结果与大鼠结果一致。2、Ola引起大鼠血浆ALT和AST活性升高、肝脏结构紊乱及脂滴增加。同时,Ola抑制肝脏α7nAchR蛋白表达,引起其下游炎症信号过度表达,上调肝脏蛋白 IRS-1 Ser307、IRS-2 Ser731 磷酸化,下调 PI3K Tyr607、AKT Ser473 磷酸化。PF改善Ola所致以上病理及分子信号的异常。结论1、Ola通过降低中枢D2R和TGF-β1系统信号引起HPRL;通过减弱肝脏α7nAchR信号,激活炎症通路,损伤肝脏。2、PF分别通过修复中枢D2R和TGF-β1系统和肝脏α7nAchR信号损伤,改善Ola所致HPRL和肝损伤。本研究结果为防治Ola所致HPRL和肝损伤等副作用开辟新思路,并为PF及含PF中药和复方治疗相关疾病提供科学依据。