背景及目的:免疫性血小板减少症(Immunethrombocytopenia,ITP)是儿童常见的自身免疫性疾病之一,其主要的治疗药物及方法有人免疫球蛋白、糖皮质激素、促血小板生成素、免疫抑制剂、脾切除术等。其发病机制目前尚不明确。大量的体外研究表明,ITP患者外周血辅助性T细胞17(Helper T cells,Th17)比例增多,血浆白介素-17(Interleukin17,IL-17)浓度明显增高。而Th17细胞主要通过IL-17等细胞因子介导炎症反应、诱发自身免疫性疾病的发生和发展。信号传导及转录激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)是 Th17 细胞分化的关键因子。已有研究表明STAT3在ITP等自身免疫性疾病中有调节作用。微小RNA(MicroRNA,miRNA)是一类非编码RNA,研究表明ITP患者外周血中miR-199a-5p的表达存在异常,提示miR-199a-5p在ITP病理生理过程中可能起着重要作用,但miR-199a-5p在ITP中具体的作用机制尚不明确。通过检测ITP小鼠模型以及过表达miR-199a-5p细胞模型中miR-199a-5p和Th17的表达情况,初步探讨miR-199a-5p是否通过影响Th17细胞分化参与ITP的发生。方法:1.利用抗小鼠CD41抗体建立剂量递增的ITP小鼠单克隆抗体诱导模型,同时利用等体积的PBS设立control组小鼠,分别使用流式检测各组小鼠脾脏单核细胞中Th17细胞比例,ELISA检测各组小鼠血清IL-17水平,Western blot检测各组小鼠脾脏单核细胞中STAT3的表达,实时定量PCR检测各组小鼠脾脏单核细胞中miR-199a-5p的表达。2.利用miR-199a-5pagomir转染健康小鼠脾脏单核细胞,建立过表达miRNA-199a-5p单核细胞模型,同时用agomir-NC(阴性对照)转染脾脏组织单核细胞设立agomir-NC组对照,磁珠和流式分选CD4+T细胞,经体外培养诱导其向Th17细胞分化,再次使用上述方法检测各组CD4+T细胞中Th17细胞比例、STAT3的表达、miR-199a-5p的表达以及细胞上清液中IL-17水平。结果:1.与control组小鼠相比,ITP小鼠脾脏单核细胞中Th17细胞的比例、STAT3的表达以及血清IL-17的水平均升高,而miR-199a-5p的表达降低。2.与agomir-NC组CD4+T细胞相比,过表达miR-199a-5p的CD4+T细胞Th17细胞比例和细胞上清液IL-17水平降低,而CD4+T细胞中STAT3表达降低。结论:1.ITP小鼠模型和过表达miR-199a-5p单核细胞模型建立成功。2.miR-199a-5p可通过负向调控Th17细胞的分化参与小鼠ITP的发生。