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硬脂酰辅酶A脱氢酶1(SCD-1)是脂肪组织和肝脏的脂肪代谢中关键的限速酶，它催化以棕榈酰辅酶A和硬脂酰辅酶A为主要底物的饱和脂肪酸(SFA)转化为单不饱和脂肪酸(MUFA)，对脂肪组织中脂肪酸的组成和脂肪沉积有着重要影响。本研究通过生物软件预测靶向SCD-1的microRNA，并从中挑选出miR-1，miR-181a，miR-186做功能分析。构建包含miR-1，miR-181a和miR-186野生型作用位点和突变型作用位点的报告基因载体pGL-1t，pGL-181t，pGL-186t和pGL-1 mt，pGL-181 mt，pGL-186mt；以NC mimics为阴性对照，将人工合成的ssc-miR-1，ssc-miR-181a和ssc-miR-186与其对应的含靶位点和突变位点载体及pRL-TK质粒共转染至CHO细胞系；用Glo-Dual荧光素酶活性检测试剂盒检测萤火虫荧光素酶活性，以pRL-TK表达的海肾荧光素酶活性校正，初步筛选对SCD-1有直接靶向关系的miRNA。将筛选出有效果的miRNA导入猪皮下脂肪前体细胞，同样以NC mimics为阴性对照，观察两组处理的皮下脂肪前体细胞表型差异并对SCD-1及相关脂肪分化基因进行检测。以HepG2细胞为模型，处理后检测SCD-1的蛋白表达水平。 研究结果表明： 1.成功构建包含miR-1，miR-181a和miR-186对SCD-13’UTR野生型作用位点和突变型作用位点的荧光素酶报告基因载体pGL-1t，pGL-18lt，pGL-186t和pGL-1mt，pGL-181 mt，pGL-186 mt。 2.荧光素酶检测结果显示与NC mimics处理组比较，miR-1和miR-186对SCD-13’UTR的野生型作用位点和突变型作用位点的作用无显著差异，而miR-181a对SCD-13’UTR野生型作用位点有显著作用(P<0.01)，对突变型作用位点无显著作用。 3.将人工合成的NC mimics和ssc-miR-181a转染至猪皮下脂肪前体细胞后，可观察到miR-181a处理后的细胞，其分化聚酯与对照组有明显差异，脂滴数量较少，分化程度明显低于对照组；检测脂肪代谢相关基因ACC、HSL、ATGL、LPL和PLINmRNA表达水平，结果显示ACC、HSL、ATGL、LPLmRNA表达水平，ssc-miR-18la处理组较对照组均升高；而PLIN mRNA表达水平，ssc-miR-181a处理组较对照组降低。 4.miR-181a序列在人和猪中保守，将人工合成的ssc-miR-181a和NC mimics导入HepG2细胞后用Western blot检测SCD-1的蛋白表达水平，结果显示miR-181a对SCD-1表达有抑制作用。 本研究筛选出调控SCD-1的miRNAs，同时验证了miR-181a对SCD-1的调控作用。鉴于SCD-1在脂肪代谢和代谢紊乱疾病中的重要作用，对SCD-1的调控研究为了解猪脂肪代谢的分子机制提供了理论依据。