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目的:探索PFOS致SH-SY5Y细胞的毒性作用及其机制,为进一步PFOS神经毒性的研究提供实验依据。方法:实验分为对照组(0μM)和PFOS剂量组(1、10、50、100、150和200μM),通过CCK8法检测不同浓度PFOS对人源神经母瘤细胞(SH-SY5Y细胞)活性的影响及其时效关系;AO/EB双重荧光染色和Annexin-V FITC/PI双染法分析PFOS对SH-SY5Y细胞凋亡形态和凋亡率的影响;紫外和荧光分光光度法检测PFOS对SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的影响;QPCR检测PFOS对SH-SY5Y细胞miRNA(has-miR-16和has-miR-22)表达水平以及BDNF、ERK1/2、CREB、DNMT1、DNMT3a和DNMT3b基因mRNA转录水平的影响;Elisa方法检测SH-SY5Y细胞上清液BDNF蛋白水平;Western Blot方法检测PFOS对SH-SY5Y细胞TrkB、ERK1/2、pERK1/2、CREB、pCREB、DNMT1、DNMT3a和DNMT3b蛋白表达水平的影响。结果:CCK8实验结果显示各浓度PFOS作用于SH-SY5Y细胞24h和48h后,细胞活性呈染毒时间和染毒剂量依赖性下降。将不同浓度的PFOS染毒SH-SY5Y细胞48h后,经AO/EB双重荧光染色和Annexin-V FITC/PI双染法流式细胞术检测,两者结果均显示SH-SY5Y细胞凋亡比例随着PFOS染毒浓度的上升而增加。紫外和荧光分光光度法结果显示PFOS引起SH-SY5Y细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH)水平下降,与对照组相比,最高剂量组PFOS引起SOD含量从8±0.12nmol/mg蛋白降至5.89±0.9nmol/mg蛋白;同时引起总活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平上升,与对照相比,最高剂量组PFOS引起MDA含量从1.92±0.17nmol/mg蛋白显著上升至6.95±0.26nmol/mg蛋白。QPCR和Western Blot结果显示PFOS干扰了BDNF-ERK-CREB信号通路,与对照组相比,在100μM PFOS剂量组中SH-SY5Y细胞上清液中BDNF蛋白水平由60±1.2ng/mL下降至29±1.5ng/mL;并且可能与SH-SY5Y细胞中has-miR-22水平上调有关;同时PFOS也干扰了甲基化转移酶DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达水平。结论:1.PFOS染毒显著降低了SH-SY5Y细胞活性;诱导了SH-SY5Y细胞产生凋亡,并呈时间剂量依赖关系。2.PFOS干扰了BDNF-ERK-CREB信号通路,这可能与has-miR-22表达水平上调有关,并且这是PFOS神经毒性的机制之一。3.PFOS对SH-SY5Y细胞产生了氧化应激损伤,并且改变了甲基化转移酶DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达水平,这也可能是PFOS神经毒性机制。