邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)是公认的动物内分泌干扰物,目前MEHP的研究主要集中于动物及临床相关的领域,越来越多的流行病学研究显示MEHP和广泛疾病的联系,但是在MEHP胁迫下细胞生存的机制还不是很清楚。近年来酿酒酵母基因缺失株文库被广泛应用于筛选和鉴定不同药物在细胞的作用靶点并探究药物发挥作用的通路。对酿酒酵母基因组水平上的MEHP适应性研究将有助于哺乳动物相关基因及信号途径的研究。为了研究真核细胞适应MEHP胁迫的分子机制,本课题利用真核模式生物酿酒酵母的二倍体非必需基因缺失株文库,筛选与MEHP胁迫相关的基因。本研究鉴定了96个对MEHP敏感的单基因缺失株,这些基因涉及麦角固醇生物合成途径,液泡蛋白分选途径以及液泡ATP酶相关的功能。用高效液相色谱测定了96个MEHP敏感缺失株在MEHP胁迫下胞内的MEHP含量,发现49株的胞内MEHP含量显著高于野生型菌株,21株显著低于野生型的菌株。在培养基中外源添加适量的麦角固醇或胆固醇可以部分抑制麦角固醇生物合成途径中的erg2和erg4缺失株对MEHP的敏感表型,而且对96株MEHP敏感缺失株的细胞麦角固醇含量测定发现,麦角固醇生物合成途径的erg缺失株细胞没有检测到麦角固醇,这表明酿酒酵母中麦角固醇在MEHP耐受过程中发挥重要的作用。此外,通过对钙离子/钙调磷酸酯酶信号途径有关基因的转录水平的测定,结果表明MEHP可以显著降低PMC1的转录水平,这说明酿酒酵母细胞中钙离子/钙调磷酸酯酶途径可能与细胞对MEHP胁迫应答相关。本论文的研究结果为进一步了解MEHP在真核生物细胞内的作用靶点和作用机制奠定了基础。