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第一部分:目的:观察腓肠肌切口痛大鼠的痛阈变化及大鼠脊髓水平Ang1-7及其Mas受体表达的变化。方法:选用16只清洁型Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠,随机分成Sham组(A组)和腓肠肌切口痛组(B组)。以热缩足反射阈值(Thermal Withdrawal Latency,TWL)和机械缩足反射阈值(Mechanical Withdrawal Threshold,MWT)为指标,观察术前0.5 h、术后0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h、24 h、48 h大鼠痛阈变化;术后48 h处死大鼠,取大鼠脊髓腰膨大组织ELISA测定各组动物Ang1-7浓度;用免疫组织化学技术检测大鼠脊髓腰膨大组织Mas受体的表达水平。结果:1与Sham组相比,腓肠肌切口痛组大鼠术后右后肢足底TWL和MWT显著减低(P<0.05);与术前0.5 h(-0.5h)比较,腓肠肌切口建模后各个时间点TWL和MWT显著减低(P<0.05),且在术后2 h达最低值,持续至术后48 h。2 ELISA检测结果显示,与Sham组相比,腓肠肌切口痛组大鼠脊髓腰膨大组织的Ang1-7蛋白含量显著降低(P<0.05)。3免疫组化结果显示,两组大鼠脊髓腰膨大组织均有Mas受体表达,大鼠脊髓腰膨大部位Mas受体表达手术组显著高于Sham组(P<0.05)。结论:急性术后疼痛可以引起大鼠脊髓腰膨大组织Ang1-7蛋白降低,同时上调该部位Mas受体的表达。第二部分:目的:观察鞘内注射Ang1-7对大鼠疼痛阈值的影响。方法:将鞘内置管成功的大鼠随机分为4组,鞘内注射生理盐水组(C组)、鞘内注射0.3 pmol Ang1-7低剂量组(A1组)、鞘内注射3.0 pmol Ang1-7中剂量组(A2组)、30.0 pmol Ang1-7高剂量(A3组),容积各为10 ul,每组6只。观测鞘内给药前后大鼠右后肢足底机械痛阈值和热痛阈值。观测时间点取大鼠鞘内给药前15min(-15min)、给药后15 min(15min),确定出Ang1-7鞘内给药的最佳剂量。完成疼痛行为学测定后将大鼠处死,取脊髓腰膨大组织行HE染色,观察神经元及神经胶质细胞的形态。结果:与生理盐水组相比,鞘内注射不同浓度Ang1-7后大鼠的机械痛阈和热痛阈值显著升高(P<0.05),且具有剂量相关性。大鼠脊髓腰膨大组织HE染色未见神经元和胶质细胞有明显的坏死、变性。结论:Ang1-7鞘内给药是安全有效的,鞘内注射Ang1-7可使大鼠痛阈升高,Ang1-7具有一定的镇痛作用。第三部分:目的:观察鞘内注射Ang1-7治疗大鼠腓肠肌切口痛的效果方法:选用鞘内置管成功大鼠进行腓肠肌切口痛建模后随机分为6组:鞘内注射生理盐水组(A组)、鞘内注射吗啡20 ug组(B组)、鞘内注射3.0 pmol Ang1-7组(C组)、鞘内注射3.0 pmol Ang1-7+0.3 pmol A-779低剂量组(D1组),鞘内注射3.0 pmol Ang1-7+3.0 pmol A-779中剂量组(D2组)、鞘内注射3.0 pmol Ang1-7+30.0 pmol A-779高剂量组(D3组),注射容积各为10 ul,每组6只,观察给药后15 min各组大鼠痛阈变化。完成疼痛行为学测定后将大鼠处死,取脊髓腰膨大行HE染色,观察神经元及神经胶质细胞的形态。结果:与生理盐水组相比,吗啡组和Ang1-7组大鼠的MWT和TWL在鞘内给药15 min后显著升高(P<0.05);吗啡组大鼠的MWT和TWL升高较Ang1-7组明显,两组差别有统计学意义(P<0.05);鞘内同时给予Ang1-7和A-779时,A-779可以对抗Ang1-7的作用,中、高剂量的A-779甚至可以完全抵消Ang1-7的作用(P<0.05)。大鼠脊髓腰膨大HE染色未见神经细胞和胶质细胞有明显的坏死、变性。结论:A-779鞘内给药是安全有效的,Ang1-7可用于治疗腓肠肌切口痛,其机制可能是通过Ang1-7与其特异性Mas受体结合实现的。