目的：通过对CD25、CD54、HLA-DR细胞膜表面分子在Graves病（GD）患者与非自身免疫性甲状腺疾病患者（甲状腺腺瘤患者瘤旁甲状腺组织）甲状腺组织中表达的比较以及表达水平与血清促甲状腺激素（TSH）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）及抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）间的相关性分析，从而探讨以上因子在Graves病发病机制中的作用。　　 方法：本研究采用病例.对照研究方法，所有研究对象均为2005年12月至2007年12月在河北医科大学第二医院内分泌科门诊诊断明确并于腺体外科住院行手术治疗的患者，其中Graves病患者（GD组）20例，女性14例，男性6例，年龄21～59岁，平均年龄（38.24±13.47）岁，经临床、实验室检查以及术后病理结果证实为Graves病；甲状腺腺瘤患者（对照组）20例，女性12例，男性8例，年龄19～61岁，平均年龄（40.05±12.83）岁，血常规、肝肾功能、甲状腺功能均正常，甲状腺自身抗体阴性，术后病理检查结果证实为甲状腺腺瘤。两组间在年龄、性别构成上无统计学差异。所有对象均于就诊当日空腹抽取肘静脉血4ml，分离血清，采用化学发光法检测血TSH、FT3、FT4及FPOAb；所有对象的甲状腺组织均在甲状腺切除术后取得（其中对照组取甲状腺腺瘤患者瘤旁甲状腺组织）。定性分析：所有对象的甲状腺组织均分别经CD25、CD54、HLA-DR单抗免疫组化法染色，阳性染成棕黄色，结果先在光学显微镜下进行半定量评估，方法如下：400倍光镜下观察全片，无免疫染色阳性之标本或阳性细胞数<10％为“-”；免疫染色阳性细胞数较少<25％，阳性较弱且散在分布者为“+”；免疫染色阳性细胞数较多且分布密集，有25％～50％阳性者为“++”；免疫染色阳性细胞数很多且分布非常密集，>50％的细胞阳性者为“+++”。定量分析：采用Motic Med6.0数码医学图像分析系统进行：200倍光镜下测定GD组和对照组患者的甲状腺组织中的平均阳性细胞数与平均阳性细胞面密度值。其中阳性细胞数的测定是记数单个光镜视野下阳性细胞的绝对个数，阳性细胞面密度值的测定是单个光镜视野下的阳性细胞的面积占全视野总面积的百分比。每个实验对象相应抗原的平均阳性细胞数与平均阳性细胞面密度值的水平是以每张玻片随机选取5个视野测量后取其平均值。阳性细胞面密度值本身是阳性百分比可作为表达强度，而阳性细胞数只是某一光镜视野下阳性细胞的绝对个数，不代表表达强度，故研究相关性时选用平均阳性细胞面密度值做相关分析。数据统计分析采用SPSS13.0统计软件进行：计量资料数据以平均值士标准差（（）±s）表示，组间均数比较用t或t’检验，等级分组比较采用行x列表x2检验，两变量之间采用直线相关分析，影响因素的估计用多元线性回归分析，检验均为双侧，检验水准以α=0.05，P<0.05为有统计学意义。　　 结果：　　 1.试验结果：　　 1.1光镜下观察对照组与GD组患者甲状腺组织结构：　　 1.1.1 HE染色结果：　　 对照组：甲状腺滤泡是由单层的上皮细胞围绕而成的囊泡，无开口；滤泡大小不等，呈圆形、椭圆形或不规则形：滤泡间排列规则有序，结构清晰；滤泡上皮细胞呈立方形或矮柱状，大小形状规则，排列紧密有序；腺泡腔内充满胶质，均匀透明；间质中血管壁细胞呈单层排列且规则。　　 GD组：甲状腺滤泡排列杂乱无章，滤泡上皮增生呈高柱状，有的呈乳头状增生，突入滤泡腔内，并有小滤泡形成；滤泡腔内胶质明显减少，稀薄和色浅，滤泡周边胶质出现许多大小不一的上皮细胞吸收空泡；间质血管丰富、明显充血，血管壁增厚，间质内淋巴组织增生。　　 1.1.2免疫组化染色结果：　　 对照组：甲状腺组织切片内罕见CD25、CD54、HLA-DR抗原阳性表达，20例患者甲状腺组织CD25、CD54、HLA-DR抗原阳性表达均为“-”。　　 GD组：20例患者中甲状腺组织CD25、CD54、HLA-DR抗原表达均为阳性，其中CD25：“+++”者有20例；CD54：“+++”者有20例；HLA-DR：“+”者有1例，“++”者有5例，“+++”者有14例。并且，所有光镜视野下抗原阳性表达区多见于淋巴细胞浸润区，远离浸润区的阳性表达则很少见。另外，CD25、CD54以及HLA-DR在甲状腺滤泡上皮细胞以及浸润的T淋巴细胞上都有表达。　　 1.2免疫组化测定：　　 1.2.1平均阳性细胞数分别为：对照组：CD25：253±24；CD54：175±24：HLA-DR：146±21。GD组：CD25：3987±1128；CD54：3068±218：HLA-DR：2840±226　　 1.2.2平均阳性细胞面密度值分别为：　　 对照组：CD25：0.0159±0.0029；CD54：0.0035±0.0004；HLA-DR：0.0041±0.0003。　　 GD组：CD25：0.1706±0.0034；CD54：0.0346±0.0019；HLA-DR：0.0991±0.0172。　　 1.3甲状腺功能测定：　　 1.3.1TSH（mIU/L）　　 对照组：min0.407～max4.081 mean1.789±1.240；　　 GD组：min0.002～max0.103 mean0.055±0.034。　　 1.3.2 FT3（pmol/L）　　 对照组：min3.46～max6.89 mean5.24±1.16；　　 GD组：min8.90～max34.91 mean20.26±8.41。　　 1.3.3 FT4（pmol/L）　　 对照组：min8.93～max20.47 mean13.90±3.47；　　 GD组：min22.94～max64.08 mean41.92±13.90。　　 1.3.4 TPOAb（IU/ml）　　 对照组：min10.4～max84.6 mean52.95±19.38；　　 GD组：min96.0～max540.0 mean300.47±145.69。　　 2.统计分析结果：　　 2.1均数间比较：　　 GD组甲状腺组织中CD25、CD54、HLA-DR的表达强度与对照组相比明显增强，均为（P<0.01）；此外，三种分子在GD组甲状腺组织中平均阳性细胞数及平均阳性细胞面密度值亦均较对照组显著升高（P<0.01）。　　 GD组中TSH较对照组明显降低（P<0.01）；FT3、FT4及TPOAb均较对照组显著升高（P<0.01）。　　 2.2相关性分析：　　 GD组患者甲状腺组织CD25，CD54，HLA-DR两组抗原表达的平均阳性细胞面密度值间有显著的正相关（P<0.01）；GD组CD25，CD54，HLA-DR平均阳性细胞数间无明显相关性；GD组CD25，CD54，HLA-DR平均阳性细胞面密度值与平均阳性细胞数间无明显相关性。　　 GD组CD25、CD54、HLA-DR平均阳性细胞面密度值均与FT3、FT4、TPOAb呈显著相关性（P<0.01），与TSH无显著相关性；GD组CD25、CD54、HLA-DR平均阳性细胞数与TSH、FT3、FT4、TPOAb无显著相关性。　　 2.3多元线性回归分析：　　 GD组中分别以TSH、FT3、FT4为因变量，TPOAb及CD25、CD54、HLA-DR平均阳性细胞面密度值与平均阳性细胞数为自变量进行多元线性回归分析，结果显示CD25、CD54、HLA-DR平均阳性细胞面密度值及TPOAb是FT3、FT4的显著影响因素（分别是FT3：R=0.726、F=20.095、P<0.01；R=0.799、F=31.754、P<0.01：R=0.807、F=75.086、P<0.01；R=0.889、F=67.982、P<0.01：FT4：R=0.709、F=18.223、P<0.01；R=0.846、F=45.350、P<0.01：R=0.917、F=95.224、P<0.01；R=0.878、F=60.830、P<0.01）：以TPOAb为因变量，CD25、CD54、HLA-DR平均阳性细胞面密度值与平均阳性细胞数为自变量进行多元线性回归分析，结果显示CD25、CD54、HLA-DR平均阳性细胞面密度值是TPOAb的显著影响因素（分别是R=0.673、F=14.936、P<0.01：R=0.728、F=20.325、P<0.01：R=0.881、F=62.200、P<0.01）。　　 结论：本实验利用免疫组织化学技术及HE染色对CD25、CD54、HLA-DR抗原在Graves病患者甲状腺组织及甲状腺腺瘤患者瘤旁甲状腺组织中的表达进行检测，通过对其表达强度与甲状腺功能指标关系的研究，发现与对照组比较，GD组甲状腺组织内三种抗原的表达强度高，TSH降低，FT3、FT4、TPOAb显著升高，且三者的表达强度与FT3、FT4、TPOAb水平间有明显相关性，与TSH无明显相关性；同时三者表达强度间呈显著相关。通过多元线性回归分析发现：CD25、CD54、HLA-DR平均阳性细胞面密度值及TPOAb是FT3、FT4的显著影响因素；此外，CD25、CD54、HLA-DR平均阳性细胞面密度值亦是TPOAb的显著影响因素。故三种抗原的表达与GD时甲亢的发生存在着密切联系，是疾病发生发展的重要因素。