【摘 要】
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头孢菌素脱乙酰酶(CAH)是生产半合成头孢菌素重要中间体D-7-ACA的首选催化剂。具有该催化活性的酶在很多生物中发现,其中来自枯草芽孢杆菌的头孢菌素脱乙酰酶已经得到充分研究,并成功应用于商业化生产中。本文构建了表达CAH的重组大肠杆菌DH5a-pCAH,利用trp启动子启动CAH基因的表达。重组菌在7L发酵罐(装液量2L)中发酵28小时,发酵液OD600达到27,产酶313kU/L发酵液,粗略估
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头孢菌素脱乙酰酶(CAH)是生产半合成头孢菌素重要中间体D-7-ACA的首选催化剂。具有该催化活性的酶在很多生物中发现,其中来自枯草芽孢杆菌的头孢菌素脱乙酰酶已经得到充分研究,并成功应用于商业化生产中。本文构建了表达CAH的重组大肠杆菌DH5a-pCAH,利用trp启动子启动CAH基因的表达。重组菌在7L发酵罐(装液量2L)中发酵28小时,发酵液OD600达到27,产酶313kU/L发酵液,粗略估算重组蛋白占细胞总蛋白的70%。发酵生产的重组CAH粗酶液经过硫酸铵分级沉淀分离纯化和超
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