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目的:学习和掌握应用新生鼠提取海马组织，进行体外培养原代海马神经元、制作阿尔茨海默病细胞模型的实验技术，从而为今后对阿尔茨海默病细胞模型的研究提供新的物质基础。同时观察β-淀粉样蛋白对海马神经元的损伤发生的线粒体动力学变化以及艾地苯醌(idebenone)在线粒体动力学水平发挥的神经保护作用。 方法:在研究中，我们采用原代提取新生SD大鼠海马组织，应用无血清的Neurobasal培养基联合B27完成体外培养海马神经细胞，并用神经元特异性烯醇化酶(NSE)进行免疫细胞化学染色来鉴定海马神经元。选择浓度为10μmol/l的Aβ(25-35)处理细胞。继而将培养成熟的海马神经元分为两组，对两组细胞通过不同时间点，不同浓度的idebenone进行预给药，然后加入Aβ(25-35)。用MTT法检测细胞活力以及细胞存活率，并摸索和选择idebenone的最适浓度。应用western blot方法检测不同处理方法下，海马神经元中线粒体动力相关蛋白DLP1和线粒体融合蛋白Mfn2表达的变化情况。 结果:在预先加入idebenone1h组中，idebenone的四种不同浓度分别为0μmol/l、0.1μmol/l、1.0μmol/l、10μmol/l的海马神经元的活力基本相同(均p＜0.05)，在预先加入idebenone24h的组中，与idebenone浓度为0.0μmol/l组相比较，浓度为0.1μmol/l,1.0μmol/l，10μmol/l组的海马神经元细胞活力明显高于0.0μmol/l组（均p＜0.05），其中idebenone浓度为1.0μmol/l组的海马神经元细胞活力最高。Western blot检测加入浓度为1.0μmol/lidebenone24h、72h后的海马神经元中DLP1和Mfn2的表达情况，实验结果表明，在加入idebenone72h后线粒体动力学相关蛋白的表达变化减少。 结论:采用对新生SD大鼠提取海马组织，通过无血清培养的方法成功进行海马神经元的体外分离培养，获得较均一纯化细胞。idebenone不仅能够改善β-淀粉样蛋白致海马神经元损伤，同时还可通过调节线粒体动力学相关蛋白的表达起到神经保护作用。