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目的：1．建立一种简单、快速的反相高效液相色谱一紫外检测法(HPLC-UV)测定血清中的犬尿氨酸(KYN)和色氨酸(TRP)。
2．用该方法建立正常人血清KYN含量和KT比值(KYN／TRP)参考值范围，并初步探讨测定血清KYN和TRP含量在慢性肾功能衰竭、慢性肾小球肾炎等疾病中的临床意义。
方法：1．血清标本与等量5％(V／V)高氯酸溶液混合处理去除蛋白后离心取上清液20ul直接进样分析。用Symmetry Shield C<,18>色谱柱(150mm×3.9mm i.d.，5um)分离；流动相为15mmol／L乙酸钠一乙酸(含2.7％乙腈，pH 3.6)溶液；流速1.0 ml／min；紫外检测波长225nm；室温下测定；10分钟内完成分析测定。KYN和TRP峰采用峰保留值比较法和叠加法定性分析，用外标法测峰面积进行定量分析。同时探讨了检测波长、流动相种类、流动相中有机相的比例以及蛋白沉淀剂等因素对分离度和灵敏度的影响，考察了其它5种氨基酸、多巴胺类物质对待测组分的可能干扰。
2．测定健康成人(n=86例)血清KYN和TRP含量，并计算KT比值，以95％可信限界定相应参数的范围。
3．测定慢性肾功能衰竭(CRF)患者(n=35例)、慢性肾小球肾炎(CG)患者(n=30例)血清KYN、TRP、肌酐(Cr)、尿素(Ur)及其它相关血液学参数，探讨慢性肾病患者不同阶段血清KYN和TRP含量变化及其在相关肾病的鉴别诊断、治疗监测等方面的意义。同时测定尿毒症血液透析患者在接受血液透析前、后血清KYN和TRP含量变化，探讨血液透析在纠正尿毒症患者外周血犬尿氨酸代谢失衡中的价值。
结果：1．血清标本内的KYN和TRP均分离良好，保留时间分别为3.50和8.10分钟。KYN线性范围为0.098～49μmol／L，最低检测浓度为0.02μmol／L；平均回收率为96.02％，日内CV为2.37％，日间CV为3.66％。TRP的线性范围为4.9～490μmol／L。最低检测限为0.20μmol／L，平均回收率为99.29％，日内CV为1.50％，日间CV为2.65％。其它氨基酸如苯丙氨酸(PHE)、酪氨酸(TYR)、犬尿喹啉酸(KYNA)和一些含有苯环结构的生物活性物质如5．羟色胺(5-HT)，肌酐(Cr)在本文的色谱条件下对KYN和TRP的测定均无干扰。
2．86例健康成人血清KYN浓度为0.364～3.022μmol／L，TRP浓度为34.642～62.270μmol／L，KT比值为11.08～47.528。不同年龄组之间，血清KYN、TRP含量及KT比值差异均无统计学意义(P>0.05)；性别之间，血清KYN、TRP含量及KT比值差异均有统计学意义(P<0.05)。
3．与正常对照组相比，CRF组、CG组患者血清KYN含量显著升高、TRP含量显著降低；与CG组相比，CRF组患者血清KYN含量显著升高、TRP含量显著降低，且CRF组血清KYN和TRP含量与肾功能状态、某些血液学参数有一定相关性；尿毒症患者血液透析治疗后血清KYN含量显著降低，TRP无明显变化。
结论：1．本文建立的HPLC-UV法可同时测定血清KYN和TRP，方法简单、快速、灵敏、特异、准确，适宜于临床与科研工作。所建立的血清KYN含量和KT比值范围可为相关疾病和基础研究工作提供参考依据。
2．CRF患者外周血存在较为严重的犬尿氨酸代谢紊乱，且与肾功能水平及CRF的某些临床症状密切相关，血液透析可显著改善尿毒症患者外周血犬尿氨酸的代谢失衡。