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致病性大肠杆菌是引起仔猪腹泻的重要病原,给养猪业带来了严重的经济损失。为了弄清我省部分养猪地区致仔猪腹泻大肠杆菌的生物学特性,我们于2011-2013年在江苏省部分养猪地区及周边地区,从临诊上疑似仔初生仔猪腹泻(黄、白痢)及断奶仔猪腹泻和／或水肿病病猪的直肠棉拭及病死猪的十二指肠共分离鉴定出576株大肠杆菌,并对其相关生物学特性进行了研究。1江苏部分地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌的O血清型、毒素型和黏附素型共分离出致初生仔猪腹泻大肠杆菌348株,除93株未定型,4株自凝外,共测定出251株大肠杆菌血清型,定型株共覆盖了44种O血清型,其中以O6、O9、O20、O24、0101、0105和0149为主,共174株,占本次定型菌株的69.32%(174/251),为本次致初生仔猪腹泻大肠杆菌调查的主要流行血清型。主要流行的血清型与以往报道的致初生仔猪腹泻大肠杆菌常见血清型间存在一定差异,如024、0105很少报道,也证实了江苏地区致仔猪腹泻大肠杆菌O血清型呈多样性的趋势。利用多重PCR,对分离的348株大肠杆菌进行毒素基因(sta、stb、lt、stx2e、eaeA)的检测。结果表明：共202株大肠杆菌检出毒素基因,检出率达58.05%(202/348)。可分为13种毒素类型,以lt+、stb+、sta+、sta+lt+4种为主要毒素类型,分别为69、55、23和20株。根据毒素特征可将这些分离株分成五种类型：ETEC、STEC、AEEC、ETEC/STEC、 ETEC/AEEC。其中ETEC共168株,占毒素基因阳性菌株的83.17%(168/202),表明ETEC仍是导致初生仔猪腹泻的最重要的病原大肠杆菌。应用玻板凝集试验,对分离的348株大肠杆菌菌株进行4种黏附素(F4、F5、F6、F41)的鉴定,结果表明：有50株大肠杆菌表达一种或多种黏附素,检出率为14.37%(50/348)。本次调查共检测出六种黏附素类型,其中以F4+F5+、F41+和F4+3种黏附素类型为主,分别检出23、11和9株。另外有3株F5+F41+,3株F4+F5+F41+以及1株F5+。对大肠杆菌O血清型、毒素类型及黏附素类型检测结果进行分析,结果显示：202株携带毒素基因的菌株主要血清型为O20、O24、O26、O78、O101、O105和O149,分别有23、33、5、6、5、5和38株。0149大肠杆菌毒素基因型主要为stb+及stb+eaeA+,分别占其毒素基因阳性株的65.79%(25/38)和23.68%(9/38)；024毒素基因型主要为stb+、sta+lt+及lt+,分别占其菌毒素基因阳性株的39.39%(13/33)、30.30%(10/33)和24.24%(8/33)。49个黏附素和毒素基因均呈阳性的分离株,可表现出10种组合形式,其中0149共38株,毒力因子组合形式为stb+/F41+(11株)、stb+eaeA+/F4+F5+(9株)、stb+/F4+(7株)、stb+/F4+F5+(7株)、lt+/F4+F5+F41+(3株)及lt+eaeA+/F4+F5+(1株),而024共的毒力因子组合形式以stb+/F4+F5+(5株)为主。2致断奶仔猪腹泻和/或水肿病大肠杆菌的O血清型、毒素型和黏附素型共分离出断奶仔猪源大肠杆菌228株,除61株未定型,4株自凝外,测定出共163株大肠杆菌血清型,定型株共覆盖了28种O血清型,其中以09、014、024、044、065、0101为主,共128株,占定型株的78.52%(128/163),为本次致仔猪腹泻和／或水肿病大肠杆菌调查的主要血清型。主要流行血清型与以往报道的断奶仔猪源大肠杆菌常见血清型存在一定的差异,如024、044很少报道,证实了我省部分地区致断奶仔猪腹泻和／或水肿病大肠杆菌O血清型呈多样化的趋势。对这些分离株进行五种毒素基因(sta、stb、lt、stx2e、eaeA)检测,共有110株大肠杆菌检出毒素基因,阳性率达48.25%(110/228)。可分为13种毒素类型,以eaeA+、sta+、 stx2e+eaeA+为主要类型,分别占毒素基因阳性株的35.45%(39/110)、18.18%(20/110)、11.81%(13/110)。根据毒素特征,可将这些分离株为七类：ETEC、STEC、AEEC、ETEC/ST EC、STEC/AEEC、ETEC/AEEC和ETEC/STEC/AEEC,分别占阳性株的30.91%(34/110)、5.45%(6/110)、35.45%(39/110)、0.91%(1/110)、11.82%(13/110)、13.64%(15/110)和1.82%(2/110)。对上述228株大肠杆菌分离株进行5种黏附素(F4、F5、F6、F18、F41)的鉴定,结果表明：有54株大肠杆菌表达一种或多种黏附素,检出率为23.68%(54/228)。本次调查共检测出9种黏附素类型,其中以F18+、F5+F41+和F5+类型为主,分别检出21、17和7株,分别占黏附素阳性株的38.89%(21/54)、31.48%(17/54)和12.93%(7/54)。对大肠杆菌O血清型、毒素类型及黏附素类型检测结果进行分析,结果显示：110个携带毒素基因的菌株主要血清型为014、024、044、065和0101,分别有8、29、7、7和5株,其中024主要见于stx2e+eaeA+和eaeA+(?)日性的大肠杆菌。54个黏附素阳性的菌株覆盖了12个血清型,以024为主要血清型,共25株。其中有11株024大肠杆菌表达F5F41,9株表达F18。32个黏附素和毒素基因均呈阳性的菌株,可表现出19种毒力因子组合形式,以stx2e+eaeA+/F18+以及sta+lt+/F18+为主要组合形式,分别为5和4株。国内外024很少报道,在本次调查中,024有8种毒力因子组合形式,以stx2e+eaeA+/F18+以及sta+lt+/v18+为主,均为3株。