呼吸道传播被认为是口蹄疫感染的一条重要途径,而黏膜免疫可以有效预防口蹄疫的呼吸道感染,因而研制口蹄疫黏膜免疫疫苗为口蹄疫的预防提供新的思路和可能性。为了增强黏膜免疫疫苗的免疫效果,克隆了牛的IL-6基因,并通过生物信息学方法预测了其在大鼠体内的活性；将IL-6基因插入到真核表达载体PcDNA3.1(+)作为分子佐剂,使其位于口蹄疫的结构蛋白前和中间,构建了重组质粒Pc-P12A3C、Pc-IL2AP12A3C、pc-P12AIL3C;通过夹心ELISA方法、间接免疫荧光法检测体外转染细胞中口蹄疫结构蛋白的表达,透射电子显微镜观察口蹄疫空衣壳的组装。为使口蹄疫核酸疫苗能够递呈至鼻及下呼吸道,并延长核酸疫苗的滞留时间,乳化扩散挥发法制备了吸附壳聚糖PLGA纳米/微球,并冷冻干燥制备成粉末。另外,还研究了壳聚糖浓度、pH对颗粒吸附质粒的影响,发现质粒的吸附率随着壳聚糖浓度的增加、pH的降低而提高。以制备的吸附壳聚糖PLGA纳米/微米球载口蹄疫DNA疫苗通过鼻黏膜免疫豚鼠,检测血清口蹄疫特异性抗体、鼻洗液口蹄疫特异性IgA水平,以及进行动物攻毒保护试验。结果显示,pc-P12AIL3C、pc-P12A3C和pc-IL2AP12A3C三个免疫组均在豚鼠诱致口蹄疫特异性IgG、IgA抗体的产生,但抗体滴度依次降低；抗强毒攻击的免疫保护分别为1/5、0/5和3/5。因此,以牛IL-6基因作为黏膜分子佐剂,吸附壳聚糖PLGA纳米/微球载口蹄疫DNA疫苗通过鼻免疫豚鼠,结果表明能够促进口蹄疫DNA疫苗黏膜免疫。