【摘 要】
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目的：通过检测磷酸化组蛋白(γH2AX)的表达,反映肿瘤细胞放化疗的敏感性,探寻指导肿瘤治疗经济、简便、快速的方法。方法：1.细胞处理1.1 X线照射：以不同剂量X线照射肝癌细胞系He
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目的：通过检测磷酸化组蛋白(γH2AX)的表达,反映肿瘤细胞放化疗的敏感性,探寻指导肿瘤治疗经济、简便、快速的方法。方法：1.细胞处理1.1 X线照射：以不同剂量X线照射肝癌细胞系HepG2.215,检测磷酸化组蛋白丫H2AX的表达及细胞活性。1.2药物作用：用不同浓度依托泊苷、阿霉素、丝裂霉素和顺铂处理肝癌细胞系HepG2.215,检测磷酸化组蛋白γH2AX的表达及细胞活性。2.免疫细胞化学：采用链霉亲和生物素蛋白一过氧化物酶法(SP法),显示磷酸化组蛋白γH2AX灶点。3.流式细胞术：采用间接荧光抗体标记法,检测表达γH2AX的细胞分数。4.MTT(噻唑蓝)比色法：检测同期照射或化疗药物处理后细胞的活性。结果：1.细胞经X线照射后,γH2AX的表达呈剂量依赖性,随着照射剂量的增高而增高；γH2AX的表达水平与细胞的死亡率呈正相关,γH2AX的表达越高,细胞的死亡率越高。2.细胞经不同浓度化疗药物处理后,对于同一种药物的不同剂量(浓度)而言,γH2AX的表达随剂量(浓度)的增高而增高；γH2AX的表达与细胞死亡率呈正相关,γH2AX的表达越高,细胞的死亡率越高。3.将γH2AX的相对表达与细胞死亡率作相关性分析,两者亦呈正相关,γH2AX的表达越高,细胞的死亡率越高。结论：γH2AX的表达与细胞死亡率呈正相关,可在一定程度上反映肿瘤细胞对于放疗和化疗的敏感性,对指导肿瘤治疗有重要意义。
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