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目的：组织蛋白酶B(Cathepsin B,CTSB)与体内多种肿瘤的发生、发展密切相关,国外研究表明,甲状腺肿瘤中同样存在组织蛋白酶B的高表达,本研究旨在观察CTSB在甲状腺良、恶性肿瘤组织中的表达情况,及其与甲状腺癌临床病理因素之间的关系,探讨甲状腺癌的病因及发病机制,为其治疗提供新的作用靶标。方法：研究对象分为甲状腺癌组、甲状腺腺瘤组和正常对照组,随机选取2008年10月-2009年6月于济宁医学院附属医院及济宁市第一人民医院乳甲外科行手术治疗的甲状腺癌和甲状腺腺瘤患者各30例,正常对照组选用甲状腺腺瘤瘤旁组织(30例)。所有患者术前均未行放疗及药物治疗。记录所有研究对象的姓名、性别、年龄等基本病例资料,并记录甲状腺癌组的肿瘤大小、包膜浸润程度及淋巴结转移情况。实验所需新鲜标本均于手术切除后半小时内采集,取材后迅速放置于液氮中保存,半小时内转存置-80℃冰箱中备用；所有标本病理类型在术后均由经验丰富的病理学专家证实。采用荧光原底物法检测CTSB的酶活性,用Westemblot法检测CTSB蛋白的表达,用RT-PCR法测定CTSBmRNA及其变异体的表达。所有数据输入采用SPSS13.0统计软件进行统计分析,p<0.05为差别有统计学意义。结果：(1)一般资料结果显示,甲状腺癌组男9例,女21例,年龄35.68±7.69岁；甲状腺腺瘤组和正常对照组各男11例,女19例,年龄32.52±6.87岁,各组间年龄、性别比较均无统计学差异(p>0.05)。(2)荧光原底物法及Westemblot结果显示,甲状腺肿瘤组织中组织蛋白酶B的活性及蛋白表达均显著高于正常组织,差别具有统计学意义(p<0.05)；且甲状腺癌组显著高于甲状腺腺瘤组(p<0.05)。(3)甲状腺癌组按照性别、年龄、肿瘤大小、是否包膜侵犯及淋巴结转移等因素进行亚组分析显示,CTSB蛋白的表达水平在有包膜侵犯亚组及淋巴结转移亚组显著升高(p<0.05),而在不同性别、年龄、肿瘤大小亚组间无明显差异(p>0.05)。(4)RT-PCR结果显示,甲状腺肿瘤组CTSBmRNA的表达显著高于正常对照组(p<0.05),甲状腺癌组显著高于甲状腺腺瘤组(p<0.05),且甲状腺癌组(5／30)存在CTSB基因变异体的表达,而甲状腺腺瘤组及正常对照组未检测到CTSBmRNA变异体的表达。结论：(1)甲状腺癌及甲状腺腺瘤组织中CTSB的酶活性、蛋白表达及基因表达水平均显著高于正常甲状腺组织,且甲状腺癌组显著高于甲状腺腺瘤组,证实CTSB与甲状腺肿瘤的发生密切相关。(2)甲状腺癌组中,有包膜侵犯及淋巴结转移的甲状腺组织中CTSB蛋白表达明显增高,表明CTSB可能与甲状腺癌的侵袭和转移有关。(3)甲状腺癌组织中存在CTSBmRNA变异体的表达,而甲状腺腺瘤组及正常对照组未检测到其表达,表明CTSBmRNA变异体可能与甲状腺癌的发生有关。