背景阈下抑郁是一种介于临床抑郁症与健康状态之间的相对较为轻微的抑郁状态。一般认为阈下抑郁是抑郁症的前期状态,对于抑郁症的发展有预测作用,阈下抑郁在人群中的患有率显著高于临床重症抑郁障碍。最新研究显示抑郁障碍与肠道菌群结构有着密切的联系,重症抑郁障碍患者常伴有肠道微生物紊乱的现象。阈下抑郁作为重症抑郁障碍与健康之间的中间状态,目前尚不知其肠道菌群结构是否出现病理改变还是与正常人群一致。针对阈下抑郁进行研究,可以进一步加深对抑郁障碍的发生发展的理解和认识,为抑郁障碍防治关口前移提供基础研究证据,符合中医“治未病”医疗观念,达到“未病先防”、“有病早治”、“既病防变”几个方面的要求。此外,中医认为体质因素在疾病的发生过程中起到重大作用,个体在受到内外界刺激后,是否会发病,发病的具体证型如何,能否自愈,很大程度上受体质类型的影响。研究显示中医体质与肠道菌群之间存在着密切的联系,体质的不同必然会对阈下抑郁个体肠道菌群的构成和各菌群之间的相互平衡造成深刻的影响。目前尚无研究从病体相关角度探讨中医体质在抑郁与肠道菌群结构中的作用。目的对比阈下抑郁个体与健康个体肠道菌群结构异同,探索阈下抑郁这一亚健康状态是否已造成病理性改变并分析具体的肠道菌群结构变化特征,为阈下抑郁的研究提供生理证据,从中医“治未病”角度为抑郁障碍防治关口前移提供参考。对比气虚质与气郁质阈下抑郁个体肠道菌群结构异同及关系,探索体质因素在阈下抑郁人群肠道菌群结构紊乱中所起具体作用,从病体相关角度为抑郁障碍防治关口前移提供参考。方法1.依据流调抑郁自评量表（CES-D）和汉密尔顿抑郁量表17项版（HAMD-17）进行筛选与分组,将参试者分为阈下抑郁组和健康对照组。采集两组参试者新鲜粪便样本,进行16S rDNA基因V4区扩增片段的高通量测序,对所获数据进行生物信息分析,了解阈下抑郁组与健康对照组的肠道菌群组成特点并对比分析异同。2.依据流调抑郁自评量表（CES-D）、汉密尔顿抑郁量表17项版（HAMD-17）以及中医体质量表筛选参试者并进行分组,将参试者分为气虚质阈下抑郁组、气郁质阈下抑郁组和健康对照组。采集参试者粪便样本,提取粪便中微生物的DNA,进行16S rDNA基因V4区扩增片段的高通量测序,对所获数据进行生物信息分析,了解三组参试者的肠道菌群组成特点并对比分析异同。结果1.招募得阈下抑郁组46人,健康对照组45人。阈下抑郁组与健康对照组比较结果显示,样品中能和操作分类单元（OTU）代表序列比对上,并且所属OTU具有注释结果的序列总数为3912992条,平均每个粪便样本中含有序列41628±6851条。其中阈下抑郁组平均每个粪便样本含有效序列40439±7809条,健康对照组平均每个粪便样本含有效序列43825±3794条。本研究将相似序列归类,共得到OTU数目20478个。对各水平下菌群的含量进行检测发现,门水平上,两组中含量最高的均为拟杆菌门和厚壁菌门;纲水平上,两组中含量最高的均为拟杆菌纲和梭菌纲;目水平上,两组中含量最高的均为拟杆菌目和梭菌目;科水平上,两组均以拟杆菌科、普雷沃氏菌科、疣微菌科和毛螺菌科为主;属水平上,两组均由拟杆菌属、普氏菌属和粪杆菌属占据主导地位;种水平上,两组均以Prevotella copri和Faecalibacterium prausnitzii为主。多样性分析结果显示,阈下抑郁组肠道菌群在观测到的物种数（sobs指数）（P=0.029）和ace指数（P=0.029）两个指标上显著低于健康对照组,在其他单个样本多样性指标上无显著性差异。主成分分析（PCA）分析结果显示阈下抑郁组与健康对照组之间分布基本重合。偏最小二乘判别分析（PLS-DA）结果显示阈下抑郁组分布与健康对照组分布存在明显差异。组间差异性分析显示,阈下抑郁组有45个OTU相对丰度显著低于健康对照组,有20个OTU相对丰度显著高于健康对照组。物种归类发现,阈下抑郁组相对丰度显著高于健康对照组的菌群多属于变形菌门和放线菌门等,而厚壁菌门以及双歧杆菌、乳酸杆菌等菌群相对丰度显著低于健康对照组。2.招募得气虚质阈下抑郁参试者20人、气郁质阈下抑郁参试者18人、健康对照参试者19人。基因测序后共获得原始成对序列3487532条,平均每个样本中含有61185±13147条。将近似性较高的序列归类到一个单元,共得到OTU数目13042个,平均每个样本内获得OTU为229±52个。门水平上,三组中拟杆菌门、厚壁菌门均是样本中丰度最高的两个菌门;纲水平上,三组中占主要地位的均为拟杆菌纲、梭菌纲;目水平上,三组中占主导地位的均为拟杆菌目、梭菌目;科水平上,三组中均以拟杆菌科、普雷沃氏菌科、疣微菌科和毛螺菌科为主;属水平上,三组中主要菌属均为拟杆菌属、普氏菌属和粪杆菌属;种水平上,三组均以Prevotella 和Faecalibacteriumprausnitzii为主。多样性分析结果显示,阈下抑郁气虚质组、气郁质组与健康对照组在所有α多样性指标上均无显著性差异。PCA分析显示,阈下抑郁气虚质组、阈下抑郁气郁质组与健康对照组之间基本重合。PLS-DA分析显示,阈下抑郁气虚质组、气郁质组与健康对照组分布之间存在明显差异。分别进行组间差异性分析显示,气虚质组与气郁质组之间肠道菌群结构存在差异,具体表现为有差异的OTU数目共有40个,在各水平上检测到有差异的有2个菌目、2个菌科、5个菌属、3个菌种。气虚质组、气郁质组与健康对照组之间存在不同程度的显著差异,阈下抑郁气虚质组与健康对照组有差异的OTU数目共有62个,在各水平上检测到有差异的有1个菌门、2个菌纲、6个菌目、11个菌科、16个菌属、10个菌种,在气虚质组中含量更高的菌群主要隶属于变形菌门,含量更低的菌群主要隶属于厚壁菌门、乳酸杆菌与双歧杆菌等;气郁质组与健康对照组有差异的OTU总数为24个,在各水平上有差异的有1个菌门、2个菌纲、3个菌目、5个菌科、5个菌属、6个菌种,具体差异分布无显著特征。结论1.阈下抑郁人群虽未达到抑郁障碍的临床诊断标准,抑郁严重程度相对较轻,但其体内肠道菌群结构失调的现象已经发生,主要表现为阈下抑郁人群体内肠道菌群总物种数显著降低,多样性虽未发生变化,但肠道菌群组成与健康人群相比较已显著不同,对人体健康有危害或会导致人体疾病的菌群相对丰度增加,同时对人体健康有利的菌群相对丰度降低,说明阈下抑郁人群已经出现生理功能紊乱,应针对阈下抑郁人群进行及早干预,防止其转变为临床抑郁。2.气虚质组与气郁质组肠道菌群结构存在差异,说明体质会影响到阈下抑郁个体的肠道菌群结构。相比于健康对照组,阈下抑郁气虚质人群与气郁质人群均存在肠道菌群结构失调的现象,但气虚质组肠道菌群结构紊乱现象更加严重,表现为气虚质组与健康人群之间存在差异的菌群种类更多,有害菌含量增加、有益菌含量减少的现象更明显。气郁质组与健康组间差异菌群数目较少,且无明显规律。这提示气虚质是阈下抑郁个体肠道菌群结构紊乱的重要危险因素,可能与气虚质人群免疫力较低以及脾胃虚弱有关。基于体质可调理论,应及早采取针对性措施,调节高危人群体质,预防临床抑郁疾病的发病和转归。