【摘 要】
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微生物抗菌肽是一类由微生物合成的小分子蛋白或多肽物质,对食品中的腐败菌和致病菌具有很强的抑制作用,是当今生物防腐领域研究的热点。本课题旨在制备高纯度的B.laterospor
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微生物抗菌肽是一类由微生物合成的小分子蛋白或多肽物质,对食品中的腐败菌和致病菌具有很强的抑制作用,是当今生物防腐领域研究的热点。本课题旨在制备高纯度的B.laterosporus S62-9抗菌肽样品,并测定其物理化学特性和生物抑菌活性。采用活性炭吸附解吸附法为B.laterosporus S62-9抗菌肽的初步分离方法,SP-Sepharose FF阳离子交换层析为进一步的纯化方法。活性炭吸附解吸附法对B.laterosporus S62-9发酵粗提液中抗菌肽的回收率将近80%,而且纯化倍数达到了19。SP-Sepharose FF阳离子交换层析法对抗菌肽回收率为63.9%,纯化倍数为119.2。抗菌肽的最后精制采用RP-HPLC,成功地制备出了液相纯的抗菌肽样品。液质联用法测得B.laterosporus S62-9产抗菌肽的分子质量为1570.13 Da。该抗菌肽的稳定性良好:100℃加热处理30 min后残留抑菌活性70%左右,经121℃加热处理30 min,回收大约50%;经pH 2-10,37℃作用1 h,剩余抑菌活性都在80%以上,但是该抗菌肽在中性条件下抑菌活性最高;该抗菌肽经蛋白酶E处理后失活,对脂肪酶和胃蛋白酶部分敏感,对蛋白酶K和过氧化氢酶不敏感;丙酮、甲醇和乙醇等多种常用化学试剂作用B.laterosporus S62-9产抗菌肽后,对其抑菌活性没有影响,但是TCA会导致该抗菌肽的失活,冰乙酸使其丧失了将近60%的抑菌活力。B.laterosporus S62-9产抗菌肽对食品中的G~+腐败菌和致病菌,包括B.cereus,S.aureus和L.monocytogenes等均有很强的抑制作用,G~-菌中,检测到其抑制一株Salmonella的生长,该抗菌肽对真菌P.sanguineus没有作用。B.laterosporus S62-9抗菌肽对S.aureus ATCC 14458的MIC为6.25 AU/mL,MBC为12.5 AU/mL,且作用方式既有抑菌作用,又有杀菌作用。由以上B.laterosporus S62-9产抗菌肽的性质可知,其在食品的生物防腐领域具有广阔的应用前景。
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