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目的:本研究旨在检测不同miRNAs在老年脓毒症患者和老年对照者血浆中表达水平,并将筛选出差异表达的miRNAs与其他炎症因子IL-6、IL-10、TNF-α和多项临床指标行相关性检验,初步探讨差异表达miRNAs用于诊断、判断脓毒症严重程度和预后的价值。方法:选取2014年3月--2016年6月在广州军区广州总医院老年重症医学科住院的82例老年脓毒症患者,男性65例,女性17例,平均年龄77.71±14.40岁。按患者的严重程度分为脓毒症组(42例)和脓毒症休克组(40例)。按28天患者转归情况分为生存组(47例)和死亡组(35例)。选取22例同期在广州军区广州总医院健康体检中心体检年龄大于65岁的老年人作为对照组,其中男性14例,女性8例,平均年龄74.05±5.72岁。收集脓毒症患者临床资料,采集脓毒症组和对照组入组时血浆样本。选择与炎症和免疫密切相关的5个miRNAs(miR-15b,miR-145,miR-146a,miR-210 和 miR-486)为目的基因,利用 qRT-PCR检测不同miRNAs在疾病组和对照组中表达情况。对差异表达miRNAs进行生物信息学分析,探讨其参与脓毒症发病的可能机制。利用酶联免疫吸附试验检测血浆中炎症因子IL-6、IL-10和TNF-α的表达水平。采用Spearman相关分析差异表达的miRNAs与炎症因子、多种临床指标的关系。绘制ROC曲线,比较差异表达miRNAs与各炎症因子、临床常用指标如PCT、CRP和临床常用评分如SOFA、APACHE Ⅱ评分的曲线下面积,评价其诊断脓毒症、鉴别疾病严重程度和判断疾病预后的价值。采用Kaplan-Meier生存分析比较miR-210不同水平组老年脓毒症患者28天、100天和长期生存情况,单因素Cox回归分析miR-210是否为患者28天、100天和长期死亡的相关因素。结果:(1)老年脓毒症患者血浆中miR-15b和miR-486表达水平低于老年对照组,miR-210高于老年对照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-145和miR-146a在两组中表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。(2)对差异表达的miR-15b,miR-210和miR-486进行靶基因预测分析,结果显示其中有62个与炎症和免疫密切相关的靶基因可能参与到脓毒症的发病机制中,进一步通过GO和KEGG分析表明这些靶基因参与调控与脓毒症密切相关的Toll样受体信号通路、TNF信号通路、细胞因子受体相关作用、MAPK信号通路等。(3)Spearman相关分析表明,miR-15b与ALT、CKMB呈正相关,与Cr呈负相关;miR-210与IL-6、IL-10、TNF-α、CRP、PCT、总胆红素、直接胆红素、BUN、乳酸脱氢酶、CKMB、α-羟丁酸脱氢酶、肌红蛋白、乳酸、SOFA评分呈正相关,与尿量、生存时间呈负相关;miR-486与IL-6、IL-10、CRP、PCT和Cr呈负相关。(4)ROC曲线分析显示,差异表达的miRNAs中,miR-486诊断老年脓毒症的AUC最大(AUC:0.887),敏感度(84.21%)和特异度(86.36%)均较高。miR-15b 和 miR-210 的 AUC 分别为0.671 和 0.651。miR-15b,miR-210 和 miR-486联合诊断的AUC高达0.959。(5)休克组和脓毒症组分析结果显示,miR-210在休克组中表达水平高于脓毒症组(P<0.05),ROC曲线分析表明miR-210鉴别休克与否的AUC为0.685,特异度和敏感度分别为82.05%和57.5%,miR-210联合SOFA、APACHE Ⅱ评分和IL-6、IL-10可提高其鉴别能力,AUC达0.873。(6)生存组和死亡组分析结果显示,miR-210在死亡组中表达高于生存组(P<0.05),其预测28天死亡的AUC为0.77,高于SOFA评分的AUC:0.707。Kaplan-Meier生存分析结果显示,以28天、100天或者长期生存时间为研究终点,高水平miR-210组死亡率均高于低水平组。单因素Cox回归分析显示,miR-210表达水平升高是患者28天、100天死亡的危险因素,但不是长期死亡的危险因素。结论:1、miR-15b,miR-210和miR-486可作为潜在的诊断老年脓毒症的生物标记物,其中miR-486诊断价值较高,三者联合诊断价值最高。2、miR-210表达水平能够反映机体炎症反应状态和器官功能障碍,可判断老年脓毒症严重程度,并可作为判断老年脓毒症短期预后的独立预测因子。