基因重组胸腺肽α1体外抗乙型肝炎病毒、体内抗流感病毒作用的实验研究

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本课题旨在对基因重组胸腺肽α1(Tα1)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)和体内抗甲型流感病毒的药效学作用进行研究。试验以HBV-DNA克隆转染人肝癌细胞(HepG2)的2.2.15细胞系为体外实验模型,通过对细胞病变(CPE)的观察,计算每浓度药液的平均细胞病变和抑制率,按Reed-Muench法计算药物对细胞的半数有毒浓度(TC50),确定最大无毒浓度(TC0)。以酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量PCR检测细胞培养上清液中的乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)和乙肝病毒核酸(HBV-DNA)的含量以此综合评价Tα1的体外抗HBV作用。同时以建立小鼠体内感染模型的方法,考察Tα1对体内感染甲型流感病毒小鼠肺指数的影响。体外抗HBV试验结果显示,Tα1浓度在40μg/ml-80μg/ml时对HBsAg、HBeAg和HBV-DNA均有明显抑制作用,抑制率分别为48.5%-56.79%,47.04%-55.31%和31.73%-68.07%,与对照组相比,具有非常显著性差异(P<0.01);Tα1对HBsAg的抑制作用强于HBeAg。动物体内抗流感病毒试验结果表明,Tα1在0.4mg/kg、0.8mg/kg剂量时,可明显减轻小鼠流感病毒性肺炎的病变程度,降低小鼠肺指数,与模型组比,具有非常显著性差异(P<0.01)。通过体内、外抗病毒试验表明,Tα1具有体外抗乙型肝炎病毒和体内抗流感病毒的活性,为临床进一步开发研究提供了理论依据和药理学基础。
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