大黄治疗急性胰腺炎的机制研究

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背景:急性胰腺炎是常见的急腹症,而其中约20%是重症急性胰腺炎,有较高的死亡率。研究证明急性胰腺炎的发生、发展与多种炎症介质有关。各种原因激活胰酶引起胰腺损伤的同时,激活了胰腺组织内的炎症细胞,促其释放大量炎症介质,并通过扳机样作用,触发炎症介质瀑布样级联反应,导致全身炎症反应综合征发生,损害心、肺,肾、脑等重要脏器的功能。核转录因子NF-κB、AP-1是这些炎症介质基因转录的主要调控因子,在急性胰腺炎早期两者就参与了相关炎症介质的转录调节。而MAPK信号通路与核转录因子NF-κB、AP-1关系密切,因此抑制NF-κB、AP-1及MAPK的激活可成为治疗急性胰腺炎的靶作用点。中医用大黄治疗急性胰腺炎历史悠久,其疗效得到肯定,但其机理并未得到很好阐明。本课题通过动物实验和临床研究观察大黄对炎症介质及NF-κB、AP-1、MAPK的作用,以探讨大黄治疗急性胰腺炎的机制。   目的:研究中药大黄对急性胰腺炎炎症介质及MAPK信号通路、核转录因子NF-κB及AP-1的作用,探讨大黄治疗急性胰腺炎的机制。   方法:实验一:将SD大鼠随机分为假手术组、急性胰腺炎(AP)组、大黄治疗组。各组分别于制模后1h、3h、6h、12h处死8只大鼠,取血测淀粉酶、TNF-α、IL-6及MCP-1;取胰腺组织进行HE染色,镜下观察,进行病理评分;实时定量PCR方法检测胰腺组织中TNF-α、IL-6及MCP-1的mRNA的变化;用Western blot方法检测各组大鼠胰腺组织中MAPK活性;EMSA方法检测各组大鼠胰腺组织中NF-κB及AP-1的活性。   实验二:根据诊断标准、纳入标准、排除标准确定的36例AP患者,随机分为大黄治疗组、对照组.大黄治疗组:入院时即在西医综合治疗的基础上加用大黄汤剂灌胃。对照组:仅给西医综合治疗.观察两组患者临床疗效、血/尿淀粉酶、及血TNF-α、IL-6、MCP-1等变化。   结果:实验一:AP组及大黄治疗组各时间点的血淀粉酶、TNF-α、IL-6及MCP-1的含量、胰腺组织病理积分、胰腺组织的TNF-α、IL-6及MCP-1 mRNA的水平、胰腺组织MAPK、NF-κB及AP-1的活性均明显高于假手术组;而大黄治疗组与AP组相比,上述各项指标水平均低,且两者差异有统计学意义。   实验二:大黄治疗组临床疗效优于对照组;治疗后大黄治疗组患者血/尿淀粉酶值、血TNF-α、IL-6、MCP-1水平低于对照组。   结论:大黄对急性胰腺炎有治疗作用。大黄可能通过抑制胰腺组织MAPK信号通路、NF-κB及AP-1的活性,减少炎症介质的释放,达到减轻胰腺损伤,治疗急性胰腺炎的目的。
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