蛋白质在碱性条件下保持活力和稳定性机制是蛋白质工程中的研究热点，但由于涉及到的机理复杂，对其研究还很少，本研究以嗜碱芽孢杆菌N16-5产生的嗜碱β-甘露聚糖酶为研究材料，对蛋白质在碱性条件下保持活力和稳定性的的嗜碱机制进行了初步研究。 　　本研究首先对从嗜碱芽孢杆菌N16-5基因组中分离得到的嗜碱β-甘露聚糖酶基因进行亚克隆，以pUC18为克隆和表达载体构建突变体库。使用dCTP和dTTP-丰富的dNTP混合物和含有高浓度Mg2+的PCR缓冲液进行易错PCR，构建突变体文库，通过高通量的筛选方法，筛选得到一个最适pH发生改变的突变体，对其一级结构和空间结构的变化进行了测定和预测，一级结构测定表明共有两个突变位点变化，为了分析是单个的位点的变化导致的酶的特性变化，还是二者共同作用导致的，构建了单一突变的嵌和体，结果发现是甘氨酸(A)到缬氨酸(Ⅴ)的变化导致了突变体酶分子的最适pH发生了变化。空间结构的预测表明可能是由于分子表面两个螺旋减少，导致的该特性的变化。 　　从该嗜碱β-甘露聚糖酶与其它的β-甘露聚糖酶的一级结构的比较来看，嗜碱酶在一级结构上并没有统一的特征来解释它们嗜碱性。