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目的：探讨姜黄素对MPTP所致多巴胺能神经元损伤的保护作用及可能机制.
方法：将清洁级雄性C57BL/6J小鼠40只,16-20周龄,体重20-30克,随机分成5组,因姜黄素溶于DMSO,所以要考虑溶剂DMSO对实验有无影响,因此分组如下:实验组1(Cur20+MPTP,姜黄素20 mg.kg<-1>.d<-1>);实验组2(Cur50+MPTP,姜黄素50mg.kg<-1>.d<-1>);对照组1(NS+MPTP);对照组2(DMSO+MPTP)和正常对照组(DMSO+NS).实验组每天定点称体重分别按姜黄素20 mg.kg<-1>、50 mg.kg<-1>灌胃×7天,每天一次,在第7天,姜黄素灌胃后1小时,按体重一次性腹腔注射MPTP(40mg.kg<-1>);对照组1、2同实验组分别予等量NS和DMSO灌胃7天,第7天灌胃后1小时,称体重一次性腹腔注射MPTP(40 mg.kg<-1>)造模;正常对照组予等量DMSO灌胃7天,第7天灌胃后1小时腹腔注射生理盐水.
第14天,小鼠被脱颈髓处死,分离出黑质和纹状体.检测指标: (1)采用高效液相色谱电化学(HPLC-ECD)法检测小鼠纹状体DA和其代谢产物HVA的含量. (2)采用免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数,以了解黑质内DA神经元的变性和坏死情况.(3)测黑质GSH,SOD活性(4)测体外姜黄素清除DPPH·自由基的能力.
结果：
(1)纹状体DA和HVA含量、黑质TH阳性神经元数量以及黑质中SOD、GSH活性测定结果均显示对照组1、2(NS+MPTP,DMSO+MPTP)与正常对照组(DMSO+NS)相比有明显降低以及对照组1、2之间无差别(p<0.05),这些结果均证实DMSO对我们的实验结果没有影响以及我们制作的PD模型是成功的.
(2)HPL.C结果显示:对照组1、2(Ns+MPTP,DMSO+MPTP)小鼠纹状体内DA和HVA含量较正常对照组显著降低,降低约70﹪;实验组(Cur20+MPTP,Cur50+MPTP)小鼠纹状体内DA和IHVA含量较对照组1、2明显升高(p<0.05).
(3)TH免疫组化结果显示:与正常对照组(DOMS+NS)比较,对照组1、2(Ns+MPTP,DMSO+MPTP)小鼠中脑黑质TH阳性神经元数量明显减少(p<0.05);实验组1、2(Cur20+MPTP,Cur50+MPTP)小鼠中脑黑质TH阳性神经元数目明显高于对照组1、2(p<0.05).
(4)黑质GSH,SOD测定结果显示:较正常对照组,对照组1、2(Ns+MPTP,DMSO+MPTP)GSH,SOD活性明显降低,与对照组1、2比较,实验组(Cur20+MPTP,Cur50+MPTP)GSH、SOD活性显著升高(p<0.05).
(5)体外测姜黄素具有显著的清除DPPH·自由基的能力.
结论：
(1)MPTP制作的小鼠PD模型是成功的.
(2)姜黄素对MPTP所致的小鼠多巴胺能神经元损伤具有保护作用.
(3)姜黄素对MPTP所致的小鼠多巴胺能神经元损伤的保护作用可能与其抗氧化作用有关.
(4)姜黄素对MPTP所致的小鼠多巴胺能神经元损伤的抗氧化作用可能与其提高自由基清除剂SOD、GSH活性以及姜黄素本身具有的自由基清除能力有关.
(5)开发以姜黄素为主的食品或药品可能有利于预防PD的发生.