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目的:开发简单、快速的前列腺癌早期诊断方法具有十分重要的经济价值和社会价值。本实验采用胶体金免疫层析法,建立快速检测PSA的方法,并且能够半定量检测4ng/ml~10ng/ml这一PSA灰区范围,并结合年龄指导前列腺活检。
方法:采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗PSA单克隆抗体1并均匀涂布于玻璃纤维素膜上,两个不同浓度的PSA单克隆抗体2和羊抗鼠二抗分别结合于硝酸纤维素膜上,依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸组装,剪成胶体金试纸并装入检测卡中。
结果:测试结果表明PSA快速检测试纸条灵敏度为4ng/ml和10ng/ml,检测时间为5min,批内和批间重复性为100%。试纸稳定性不因保存温度改变而受影响。用临床60例血清标本检测,并与化学免疫荧光法测试结果进行比对,在灵敏度为4ng/ml时,两种检测方法符合率为100%,在灵敏度为10ng/ml时,两种检测方法符合率为95%,经X2检验分析两者没有统计学差异。
结论:本胶体金检测试纸优化了其传统的定性的检测效能,能对PSA进行半定量检测,确定4ng/ml~10ng/ml这一灰区范围,检测时间短,操作简便、结果准确可靠、稳定性、重复性好、成本低廉。其检测结果可结合患者年龄对前列腺癌进行初步诊断,进一步指导前列腺活检。