研究背景与目的近年来,随着糖尿病患病率升高,糖尿病并发脑血管病患者逐渐增多。糖尿病能引起脑血管损害,造成严重的中枢系统并发症,主要表现为脑内小血管和大血管病变,产生相应的临床症状及影像学表现。随着神经影像学技术飞速发展,神经影像学手段广泛应用,脑小血管病(cerebral small vascular disease,CSVD)被大量发现,脑小血管病的诊断标准也逐渐达成专家共识。其中,已经明确可造成脑小血管病的主要的危险因素为年龄和高血压、糖尿病等。糖尿病作为危险因素,对脑小血管造成的损害及其病理机制临床和影像均有研究报道。但本文通过探讨糖尿病脑小血管病患者颅脑磁敏感加权成像(Susceptibility Weighted Imaging, SWI)影像学特点,期望为临床工作提供更多临床评价依据,进一步提高临床医生对该病的认识及重视,尽早对糖尿病患者脑小血管病做出准确诊断。尽力提高控制相关危险因素积极性,减少脑小血管病的发生率,降低患者病死率。研究方法建立病历资料调查表,回顾分析山东省千佛山医院神经内科自2010年10月1日至2015年10月1日以来收治的脑小血管病患者共867例。筛选出患有糖尿病、进行颅脑SWI影像学检查者30例,详细记录其临床资料及影像学资料。选取与糖尿病脑小血管病组匹配的非糖尿病脑小血管病患者30例作为对照组,分析两组患者临床病历资料及SWI影像学资料,并进行统计学分析。结果：经过人口统计资料匹配分析,糖尿病组患者与非糖尿病组两组患者平均年龄、男女性别比、受教育程度(年限)、吸烟史均无明显差异(P>0.05)。两组患者血液生化指标,包括血清总胆固醇、血清低密度脂蛋白胆固醇、血清甘油三酯、肌酐、尿素均无明显差异(P>0.05),血糖,糖化血红蛋白糖尿病组患者明显高于非糖尿病组患者(P<0.05)。两组患者伴发病如高血压、高胆固醇血症、短暂性脑缺血发作(Transient ischemic attack,TIA)、症状性卒中等,无明显统计学差异(P>0.05),两组患者简易精神状态检查表(Mini-Mental State Examination, MMSE)评分,糖尿病组患者认知功能障碍程度较重(P<0.05)。两组患者颅脑SWI微出血灶呈现典型的斑点状低信号,主要分布于大脑皮层和皮层下、基底节、丘脑等部位。糖尿病组患者颅脑SWI微出血灶数目明显多于非糖尿病组患者(P<0.05),糖尿病组患者脑内小血管数目较非糖尿病组患者明显减少(P<0.05)。结论糖尿病脑小血管病患者更易发生认知功能障碍。颅脑SWI影像学显示,糖尿病脑小血管病微出血灶好发于大脑皮层和皮层下、基底节、丘脑等部位。基于SWI影像分析的糖尿病损害造成脑小血管病微出血灶明显增多,基于SWI影像分析的脑内小血管数目明显减少。研究目的糖尿病作为脑小血管病的独立危险因素之一,能够引起严重的脑内损害。已知糖尿病能够导致淀粉样蛋白脑内清除机制障碍,从而导致淀粉样蛋白脑内水平增加,最终产生脑内沉积,造成神经元损伤及血管病变。糖尿病的高糖代谢状态能够启动氧化应激反应导致脑组织炎症水平增高,导致血脑屏障功能受损,进一步促进淀粉样蛋白脑内沉积。但淀粉样蛋白沉积在糖尿病脑内的病理类型并不清楚。为此,本课题主要目的是通过观察糖尿病大鼠脑组织中Aβ1-40、ApoE的表达特征,初步探讨和是否参与糖尿病脑组织损伤的发生发展；研究病程、年龄对糖尿病大鼠脑内Aβ1-40、ApoE表达的影响；研究在2型糖尿病大鼠脑内Aβ1-40与ApoE表达的相关性。研究方法(1)采用高脂饲料联合小剂量STZ诱导的Ⅱ糖尿病大鼠作为动物模型,将其按病程分为3月龄(n=15,3MDM组)及6月龄(n=15,6MDM组)2组,将正常Wistar大鼠3月龄(n=15,3M组)、6月龄(n=15,6M组)作为对照组。(2)运用免疫组织化学染色法检测脑组织中Aβ1-40、ApoE的表达及空间分布。(3)运用RT-qPCR、Western Blot法分别测定各组大鼠脑内ApoE的mRNA、蛋白表达水平。(4)采用GraphPad Prism 5软件进行统计分析,所有数据以x±s表示,多组数据比较采用单因素方差分析,组间差异比较采用两样本t检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)Aβ1-40在各组大鼠脑内的表达：Aβ1-40在微血管壁上、微血管周围均有沉积,推测淀粉样蛋白沉积在糖尿病脑血管病大鼠脑内存在血管壁沉积(perivascular Aβ-deposition)和血管周沉积(Capillary CAA)两种病理类型。3MDM组与3M组相比、6MDM组大鼠与6M组相比脑组织中Aβ1-40的表达均明显增加(P<0.05),6M组与3M组相比、6MDM组与3MDM组相比脑组织中Aβ1-40的表达均明显增加(P<0.05)。(2) ApoE在各组大鼠脑内表达部位及特点：3MDM组与3M组相比、6MDM组大鼠与6M组相比脑组织中ApoE的表达均明显增加(P<0.05),6M组与3M组相比、6MDM组与3MDM组相比脑组织中ApoE的表达均明显增加(P<0.05)。(3)在mRNA、蛋白水平上,3MDM组与3M组相比、6MDM组大鼠与6M组相比脑组织中ApoE的相对表达量均有明显差异(P<0.05),6M组与3M组相比、6MDM组与3MDM组相比脑组织中ApoE的相对表达量均有明显差异(P<0.05)。(4)通过Person相关性分析,在不同大鼠的脑内, Aβ1-40与ApoE呈正相关性(r=0.9741,P<0.05)。结论(1)Aβ在2型糖尿病脑血管壁上、血管周围均有表达,推测糖尿病大鼠脑血管淀粉样蛋白的沉积为血管壁沉积和血管壁周围沉积两种类型。(2)2型糖尿病可促进大鼠脑组织内Aβ1-40的表达,随年龄的增长和糖尿病病程的进展,Aβ1-40的表达相应增加。(3)2型糖尿病可促进大鼠脑组织内ApoE的表达,随年龄的增长和糖尿病病程的进展,ApoE的表达相应增加。(4)随着年龄和糖尿病病程增加,脑组织Ap及ApoE沉积均增加,两者表达存在正相关性。