【摘 要】
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目的:通过检测肾脑复元汤不同剂量含药血清在不同时间段对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)的增殖作用及对其周期的影响,探究肾脑复元汤联合h UC-MSCs在动物实验中最佳时效及量效关系,为二者联合在干预缺血性脑卒中神经保护作用积累实验依据。方法:1.采用高、中、低剂量肾脑复元汤水煎液灌服SPF级SD大鼠,制
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目的:通过检测肾脑复元汤不同剂量含药血清在不同时间段对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)的增殖作用及对其周期的影响,探究肾脑复元汤联合h UC-MSCs在动物实验中最佳时效及量效关系,为二者联合在干预缺血性脑卒中神经保护作用积累实验依据。方法:1.采用高、中、低剂量肾脑复元汤水煎液灌服SPF级SD大鼠,制备含药血清,以正常血清为对照。2.经CCK-8观察含药血清对细胞增殖的影响,选择20%质量分数的血清浓度及用于后续干预体外培养的h UC-MSCs;3.流式细胞术检测不同时间各组细胞周期情况;4.免疫蛋白印迹{Western blot}法检测β-catenin、c-myc、cyclin D1的蛋白表达水平。结果:1.CCK-8法检测:10%含肾脑复元汤血清在48小时对h UC-MSCs的增殖活性最佳。2.流式细胞周期结果表明:10%肾脑复元汤含药血清在处理细胞后48小时可以诱导细胞周期向G2/M期转变。3.Western blot法检测:10%肾脑复元含药血清干预h UC-MSCs在一定程度上对β-catenin、c-Myc、cyclin D1蛋白表达起到促进作用,且在48小时时间段最佳。结论:肾脑复元汤可促进对促进h UC-MSCs增殖及诱导细胞周期向G2/M期转变,且在10%含药血清在48小时段最佳,从为二者联合治疗缺血性脑卒中提供依据,且有保护神经元的作用,此作用可能与其促进蛋白β-catenin,c-Myc、cyclin D1表达有关。
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