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目的：流行病学表明，约60％糖尿病患者并发糖尿病神经病变，以糖尿病神经病理性痛(Diabetic Neuropathic Pain，DNP)最为常见。DNP是临床最常见的神经病理性疼痛类型之一，可出现自发痛、痛觉过敏、触诱发痛和其他不典型感觉异常，严重影响患者生活质量。理想的治疗方法和药物开发依赖于对DNP发生机制的认识。研究表明，脑源性神经营养因子(Brain Derived Neurophic Factor, BDNF)/TrkB系统及其对胞内Ca2+浓度的调节参与不同原因所致的痛觉过敏的形成和发展，但详细机制仍不清楚。我们的预实验发现，在DNP大鼠中，经典瞬时受体电位离子通道6(TRPC6)对机械性痛敏发挥调节作用，这种作用也可能和DRG神经元内Ca2+浓度改变密切相关。因此，我们提出并探讨TRPC6介导BDNF通路对神经元内Ca2+浓度调节，参与DNP大鼠机械性痛敏形成的作用和可能机制。 方法：应用Von Frey细丝测量大鼠机械性痛觉阈值;应用免疫荧光技术检测脊髓和背根神经节中BDNF和TRPC6的表达;应用Western blot技术检测大鼠脊髓和背根神经节BDNF和TRPC6的表达;运用钙离子成像技术检测大鼠DRG神经元中Ca2+浓度的变化。 结果：1 STZ诱导DNP模型大鼠机械性痛觉阈值在注射STZ(60mg/kg)后逐渐降低，与正常对照组相比，21天左右降幅最大(P＜0.001)。Western blot结果显示，分别在注射STZ后第7天，14天，21天和28天取材的DRG和脊髓中，与正常对照组大鼠相比，BDNF和TRPC6蛋白表达增加，与正常对照组相比，21天达到峰值(P＜0.01)。免疫荧光结果表明在DNP模型大鼠的DRG神经元和脊髓背角浅层中BDNF和TRPC6表达均较正常对照组增加(P＜0.05)。2鞘内注射酪氨酸激酶受体抑制剂K252a(200ng/10ul)和扣压BDNF的TrkB-Fc(200ng/10ul)分别非特异和特异性抑制BDNF通路，DNP大鼠的机械性痛觉阈值较DNP+溶媒组明显升高(P＜0.01)，正常大鼠阈值无明显变化。鞘内注射非选择性牵张激活阳离子通道抑制剂GsMTX-4(100ng/10ul)和TRPC通道抑制剂BTP2(5ug/10ul)非特异抑制TRPC6通道后，DNP大鼠的机械性痛觉阈值较DNP+溶媒组升高(P＜0.05)，正常大鼠阈值无明显变化。鞘内注射TRPC6的反义寡核酸AS ODN(10ng/10ul/天，X3天)，特异性抑制TRPC6通道，DNP大鼠的机械性痛觉阈值较DNP+MM组显著升高(P＜0.05)，正常大鼠阈值无明显变化，同时Western blot结果显示在正常和DNP大鼠的DRG和脊髓中，反义寡核酸敲除TRPC6后，TRPC6的表达均减少(P＜0.05)。3正常大鼠鞘内注射TRPC6的AS ODN(10ng/10ul/天，X3天)抑制TRPC6后再鞘内给予BDNF(20ng/10ul)，大鼠机械性痛觉阈值较Control+AS+PBS组明显降低(P＜0.05)，而在DNP大鼠DNP+AS+BDNF组和DNP+AS+PBS组机械性痛觉阈值则均明显升高，差异无统计学意义（P＞0.05）。4钙离子成像技术显示，正常和DNP大鼠急性分离的DRG神经元，应用BDNF(20ng/2ul)，Ca2+浓度明显升高。而BDNF刺激经反义寡核酸敲除过TRPC6通道的DNP大鼠的DRG神经元，Ca2+浓度变化不大。正常大鼠予以相同处理后Ca2+浓度明显升高。 结论：TRPC6通道介导了BDNF信号系统参与的糖尿病神经病理性痛机械性痛敏的形成。