重组survivin腺病毒对喉癌细胞抗凋亡作用的体外实验研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:arigadordor
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背景和目的:Survivin基因(也称生存素)作为凋亡抑制蛋白(Inhibitot ofApoptosis Proteins,IAPs)家族成员之一,是目前发现的最强的凋亡抑制因子。研究表明它在胚胎组织及大多数恶性肿瘤组织中高表达,而在正常分化成熟组织中不表达或低表达,因为该基因生物学功能及组织分布的特殊性,自从1997年被发现以来就备受医学工作者关注。随着头颈部肿瘤研究的快速发展,肿瘤的基因治疗越来越受到人们的关注。研究显示survivin基因在喉癌组织中高表达,而在正常的喉腔组织中不表达,但有关survivin基因对喉癌细胞的抗凋亡作用及其机制的研究报道较少,所以本实验是在前期实验构建重组survivin腺病毒的基础上,观察SUrvinvin基因在人喉癌细胞系Hep-2细胞中抗凋亡作用及相关凋亡蛋白的表达变化,期望能够有利于survivin基因对喉癌细胞抗凋亡作用机制的阐述,从而为喉癌的基因治疗提供理论依据。  方法:实验分为四组:病毒大剂量,病毒小剂量组,空白对照组和pLP-AD-X空病毒对照组。分别用重组的survivin腺病毒及对照组感染人喉癌细胞系HeF-2细胞后用光镜下形态学观察、MTT法观察细胞生长情况、FACS法检测细胞周期变化、Western法检测survivin及相关凋亡蛋白表达情况。  结果:重组survivin腺病毒感染人喉癌Hep-2细胞48h后,显微镜下可见明显的细胞生长旺盛;FACS法检测见G1/S和G2/M期的细胞增多;Western法见凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-10和caspase-11在病毒感染后表达减少。  结论:重组survivin腺病毒在体外能够有效地抑制人喉癌Hep-2细胞凋亡,并且其抗凋亡作用与caspase-3、caspase-10和caspase-11有相关性。
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