铁皮石斛组培繁殖及其内生真菌的研究

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随着对铁皮石斛药用资源的深入研究,其作为传统保健中药材在将来会更加蓬勃发展。而铁皮石斛的人工繁殖仍然有许多问题存在,如组培生产周期较长、成本高、移栽时对基质要求很高、成活率不高等。本研究以铁皮石斛为材料,进行组织培养铁皮石斛条件优化以及野外接内生菌的研究与探讨,主要结论如下:   1.铁皮石斛原球茎增殖的适宜培养基为:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,原球茎的分化适宜培养基为MS+NAA2mg/L+6-BA0.2mg/L,壮苗和生根的最适宜培养基为:MS+NAA1mg/L。   2.从根腐铁皮石斛苗根部分离到四株致病菌,形态学鉴定其为镰刀菌(Fusariumspp.),曲霉(Aspergillus sp.)和木霉(Trichoderma sp.)。用四个铁皮石斛内生菌根丝核菌菌株GS222、GDB162、GDB254、MLX102与病原菌作对峙培养试验得出:这四个菌株对镰刀菌有明显抑制作用;GS222、GDB162、GDB254这三个菌株对曲霉有微弱抑制作用。   3.铁皮石斛组培苗接种菌根丝核菌GDB254、GDB162、GS222、MLX102菌株60d后,菌株GDB254接种的铁皮石斛鲜重增长率为92%,MLX102为86.2%,GS222为82.2%,GDB162为54.9%;   4.野外盆栽铁皮石斛接菌根菌试验结果表明:四个丝核菌菌株中GDB254促生效果最好;接内生菌的适宜时间是移栽30d后;栎叶培养的内生菌接种适宜接种浓度为9片直径为5mm的圆饼,PSA液体培养的内生菌接种适宜浓度为1g菌丝;   5.接4个丝核菌的铁皮石斛苗多糖含量都比对照苗高,多糖含量最高的是GDB254接菌的苗。
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