茶油制备共轭亚油酸及其抗氧化活性的研究

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共轭亚油酸(CLA)具有促进生长、提高免疫力、降脂、抗氧化等多种生理功能,对人体健康有着重要促进作用。然而天然共轭亚油酸来源不足,成为了其发展的重要阻碍因素。茶油中含有丰富的油酸,是天然植物油酸最主要的来源,可以成为制备共轭亚油酸的原料。本文利用茶油油酸合成共轭亚油酸,在此基础上研究了Ag+硅胶层析柱对共轭亚油酸分离的效果,同时制备了共轭亚油酸-精氨酸衍生物,研究了其抗氧化活性和对硬脂酰辅酶A脱饱和酶(SCD)活性的影响。具体的研究内容和成果如下:(1)以茶油为原料制备茶油脂肪酸甲酯,其最佳工艺条件为茶油甲醇摩尔比1∶12,催化剂甲醇钠用量0.5%,反应温度80℃,反应时间150 min,在此条件下,茶油甲酯化得率为93.17%。(2)以茶油脂肪酸甲酯为原料,使用二氧化硒和叔丁基过氧化氢作为催化剂制备茶油CLA甲酯。采用响应面分析,得茶油CLA转化率最佳的工艺条件:反应温度49.8℃,反应时间9.6 h,叔丁基过氧化氢用量3.7 eq。在最优条件下,茶油共轭亚油酸甲酯的转化率为64.95%。所制备的共轭亚油酸甲酯纯度为53.45%,其具体组成为:棕榈酸甲酯17.33%,油酸甲酯20.75%,反式油酸甲酯0.86%,硬脂酸甲酯4.4%,9c,11t-共轭亚油酸甲酯14.78%,9c,11c-共轭亚油酸甲酯8.74%,10t,12c-共轭亚油酸甲酯29.93%。(3)用Ag+硅胶层析柱对制得CLA甲酯样品进行分离纯化,结果表明:Ag+硅胶层析柱对去除CLA甲酯样品中的棕榈酸、硬脂酸、油酸有着明显效果,但对不同结构的CLA分离效果十分有限。使用10%乙酸乙酯-正己烷作为洗脱剂时纯化效果最佳,将茶油CLA纯度从53.45%提高到了90.4%。(4)以茶油CLA甲酯为原料,制备CLA-Arg衍生物。对CLA-Arg的抗氧化活性进行评价,结果显示其对DPPH、ABTS、羟基自由基的IC50值分别为2.82 mg/mL、1.37mg/mL、3.47 mg/mL。采用分子对接模拟,考察CLA、CLA-Arg与SCD的相互作用,结果表明两者均能抑制SCD的活性,且CLA-Arg的抑制效果较强,有望成为治疗SCD代谢疾病的新型药物。
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