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目的：研究Fibrosin与肝纤维化的关系，为肝纤维化的诊断提供较为敏感的标志物。探讨灵猫方防治肝纤维化的作用机制，为中医药防治肝纤维化提供新的理论依据和有效药物。
方法：1.①52例慢性乙型肝炎患者做肝脏穿刺活检，行苏木素-伊红和Masson三重染色、肝脏纤维化分期和炎症活动度分级。②检测患者常见肝功能指标：丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、HBV-DNA载量，及外周血单个核细胞Fibrosin-mRNA的表达。③将结果与肝组织病理分级和(或)分期进行相关性分析。2.①无菌分离小鼠淋巴细胞，加入ConA刺激，实时荧光定量PCR检测Fibrosin-mRNA的表达情况。②无菌分离小鼠淋巴细胞，加入ConA刺激，Western blot检测Fibrosin蛋白的表达情况；③无菌分离小鼠淋巴细胞分别做LY294002、SB203580、SP600125、PD98059预处理，后加入ConA，通过Western Blot检测这些特异性阻断剂对Fibrosin蛋白表达的影响；④无菌分离小鼠淋巴细胞，加入ConA刺激，通过Western Blot检测ERK1／2、P-ERK1／2蛋白表达情况。3.55只BALB／c小鼠随机分为4组：正常组、模型组、秋水仙碱组、灵猫方组。采用ConA尾静脉注射制作肝纤维化模型，15mg／kg，每周两次，共10周。正常组给予双蒸水管胃，其余组分别给予秋水仙碱、灵猫方。末次管胃24h后处死小鼠，检测ALT、ALT、ALB、DBIL，肝组织羟脯氨酸含量，以及肝脏病理变化。实时荧光定量PCR检测肝组织Fibrosin-mRNA表达，Western Blot检测肝组织Fibrosin蛋白的表达。
结果：1.①按照肝组织纤维化程度(S)分组，外周血单个核细胞Fibrosin-mRNA水平随着肝纤维化程度加重水平逐渐升高，各组与前一组比较均有明显差异(P＜0.01)。②按照肝脏炎症活动度(G)分组，随着炎症活动度的加重，Fibrosin-mRNA表达有增高的趋势，G2与G1比较有明显的统计学意义(P＜0.01)，但G3与G2，G4与G3比较，虽然有升高的趋势，但差异无统计学意义(P＞0.05)。③Fibrosin-mRNA与S呈显著正相关：ALT、AST、TBIL与S呈正相关、ALB与S呈负相关，相关性弱于Fibrosin-mRNA，HBV-DNA与S无明显相关性。2.①ConA能刺激小鼠淋巴细胞Fibrosin-mRNA表达，12h达到高峰，与空白组比较，有明显差别(P＜0.01)，其后Fibrosin-mRNA表达迅速下降。②ConA能刺激淋巴细胞Fibrosin蛋白表达，至48h达到最高水平，与空白组比较有明显差异(P＜0.01)，其后Fibrosin表达逐渐下降。③PD98059可以抑制Fibrosin蛋白的表达，LY294002、SB203580、SP600125对Fibrosin的表达无明显影响。④各组ERK1／2表达无明显差异(P＞0.05)；在ConA刺激下，可以上调P-ERK1／2表达，20min达到高峰。3.①模型组ALT、AST较正常组明显升高(P＜0.01)，秋水仙碱组ALT、AST较模型组降低，但无统计学院意义，治疗组ALT较秋水仙碱组明显降低(P＜0.01)，AST则无明显差异。与正常组相比，模型组ALB显著降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，秋水仙碱组、灵猫方组血清ALB水平高于模型组(P＜0.01)，但二者之间无明显差异；与正常组相比，模型组DBIL显著升高(P＜0.01)，秋水仙碱组，灵猫方能降低血清DBIL表达，灵猫方组与模型组相比(P＜0.01)，但与秋水仙碱组比较差异无统计学意义。②与正常对照组比较，模型组小鼠肝组织HyP含量显著增高(P＜0.01)。与模型组相比秋水仙碱组、灵猫方组能显著降低肝组织中HyP的含量(P＜0.01或P＜0.05)，且二者之间亦有明显差异(P＜0.01)。③HE，天狼星红染色显示，肝纤维化治疗组较模型组明显减轻，且优于秋水仙碱。胶原定量分析结果表明，模型组胶原染色指数明显高于正常组(P＜0.01)，秋水仙碱组、灵猫方组胶原显色指数明显低于模型组(P＜0.01)，但二者之间无明显差异(P＞0.05)。④模型肝组织中Fibrosin-mRNA的表达明显增多，秋水仙碱、灵猫方可显著降低肝组织中Fibrosin-mRNA表达(P＜0.01或P＜0.05)，且二者之间亦有显著性差异(P＜0.05)。⑤与正常组相比，模型组Fibrosin蛋白表达明显升高(P＜0.01)，秋水仙碱、灵猫方组与模型组相比明显下调Fibrosin的表达(P＜0.01)，且二者之间亦有明显差异(P＜0.05)。
结论：1.Fibrosin与肝纤维化呈正相关，能较好反映肝纤维化程度；2.ConA可以诱导淋巴细胞Fibrosin蛋白的表达，与ERK信号通路的活化密切相关；3.灵猫方具有良好的抗肝纤维化作用。