多发性硬化症(Multiple Sclerosis, MS)是一种中枢神经系统慢性炎症性脱髓鞘性疾病,目前临床上没有满意的治疗药物。因此,探索新药物对于改善MS的治疗非常重要。实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis, EAE)是MS的动物模型,也是自身免疫炎症反应基础研究的重要模型。MS和EAE均被证明是CD4阳性T细胞,主要是TH1和TH17细胞,介导的自身免疫炎症性神经退行性疾病。树突状细胞(Dendritic Cell, DC)是一种专职的抗原提呈细胞,在免疫反应的起始中起着重要作用。未成熟树突状细胞(immature Dendritic Cell, iDC)的主要功能是抗原提呈,而成熟树突状细胞(mature Dendritic Cell, mDC)主要功能是诱导T细胞活化。并且DC可根据不同的信号刺激而对应的分泌TH1、TH2、TH17以及Treg细胞分化相关的细胞因子,而这些不同亚型T细胞极化因子可以诱导初始T细胞向相应的T细胞亚型极化,进而与不同类型疾病相对应T细胞亚型行驶不同的生理功能。基于DC在免疫系统中的重要作用,它可能成为控制自身免疫和炎症性疾病的潜在治疗靶点。伏立诺他(Vorinostat)是一种组蛋白去乙酰化酶(Histone Deacetylase, HDAC)抑制剂,已被批准用于临床治疗皮肤T细胞淋巴瘤,但是伏立诺他对于自身免疫病如MS和其动物模型EAE的研究并不完善,这也是本研究的重点内容。研究目的：体外实验探究组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他对人CD14阳性单核细胞来源的DC的分化、成熟、抗原摄取和DC介导的T细胞增殖的影响,以及对炎症相关因子分泌的调节作用；体内实验进一步探究了伏立诺他对EAE作用和细胞机制。本研究为MS等炎症性疾病探索新的治疗途径。实验内容和方法：体外研究用磁珠分离法从人外周血单核细胞中分离出CD14阳性单核细胞,然后诱导向DC分化和成熟,用流式细胞术检测表面标记。用流式细胞术检测FITC-dextran摄取的方法检测iDC抗原摄取能力。用混合淋巴细胞反应方法检测mDC刺激T细胞增殖的能力。并用实时定量PCR检测细胞因子的分泌情况。体内研究应用小鼠注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein, MOG)诱导EAE,同时应用伏立诺他灌胃治疗,每天观察小鼠并做临床评分。脊髓切片用H&E染色、Luxol fast blue染色和免疫组化染色。流式细胞术检测EAE中伏立诺他对脾脏中不同T细胞亚型的影响,以及对DC的影响。实验结果：体外实验流式细胞术结果表明伏立诺他降低iDC和mDC表面标记CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达,即抑制DC分化和成熟。并且,伏立诺他降低了iDC抗原摄取能力和mDC介导的T细胞增殖,抑制了DC中TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-12p35和IL-23p40的mRNA表达水平。体内实验显示伏立诺他治疗可降低EAE的发病率,推迟发病时间,降低了临床评分平均分、总分和最高分。H&E和Luxol fast blue染色结果显示,伏立诺他缓解小鼠脊髓中炎症细胞浸润和脱髓鞘情况。脊髓石蜡切片免疫组化结果显示伏立诺他抑制T细胞和巨噬细胞浸润。而且,伏立诺他抑制EAE中TH1和TH17细胞,降低了DC表面标记表达。体内实验结果与体外伏立诺他抑制人CD14阳性单核细胞来源的DC的实验结果一致。总之,伏立诺他可抑制人CD14阳性单核细胞来源的DC分化、成熟和抗原摄取及抗原提呈功能。伏立诺他可抑制中枢神经系统的自身免疫炎症反应,体内抑制DC、病理性TH1和TH17细胞,缓解EAE的发生和发展。伏立诺他对EAE具有治疗作用。本论文为应用HDAC抑制剂伏立诺他治疗MS等炎症相关疾病奠定了理论基础。